树舌灵芝深层发酵培养基的优化研究

通过单因素试验,确定以米糠和蔗糖为复合碳源,黄豆粉为氮源,以筛选的碳源、氮源与无机盐KH2PO4 和MgSO4·7H2O为考察因素,以菌丝干重和总三萜产量为主要指标,利用正交设计法优化树舌灵芝菌丝体培养基配方比例,确定树舌灵芝液体发酵培养基最佳配方为:米糠40.0 g/L,蔗糖10.0 g/L,黄豆粉40.0 g/L,磷酸氢二钾 2.0 g/L,硫酸镁 0.5 g/L, 自然pH.于25 ℃、120 r/min振荡培养7 d,该菌菌丝体干重高达21.41 g/L,总三萜产量为69.94 g/L.     

树舌灵芝菌丝体多糖提取条件的研究

对树舌灵芝菌丝体粗多糖的提取条件进行研究,通过单因素试验和L9(34)正交试验设计等方法,重点考察不同的浸提剂、浸提温度、料液比、浸提时间、乙醇沉淀倍数对树舌灵芝多糖提取率的影响.结果表明,最佳提取条件为:浸提剂为氢氧化钠(4%),料液比为1:30(g/mL),温度为80℃,时间为4h,乙醇沉淀体积为3倍,多糖提取率为4.022%.     

大别山区域树舌灵芝和云芝抗氧化活性研究

为探索大别山区域多孔菌科真菌特点,本研究选用大别山区域两种野生多孔菌科真菌树舌灵芝(Ganoderma lipsiense)和云芝栓孔菌(Coriolus versicolor)为研究材料,以人工栽培灵芝(Ganoderma Lucidum Karst)为对照,分离纯化获得纯种菌丝,液体培养并无菌抽滤后制备粗酶溶液。通过测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及过氧化氢酶的活性来探究其抗氧化活性特点。结果:树舌灵芝和云芝的超氧化物歧化酶活性分别为82. 38U/g、85. 40U/g,分别高于对照组10. 4%、14. 5%;过氧化氢酶活性分别为38. 63U/g·min、39. 67U/g·min,分别高于对照组6. 4%、9. 3%;谷胱甘肽过氧化物酶活性分别高于对照组11. 0%、10. 4%。供试材料的三种酶活性均高于对照品,说明大别山区域树舌灵芝和云芝具有较强的抗氧化活性,这为大别山区域多孔菌科真菌的进一步研究奠定基础。     

树舌滋补甜米酒的研制

本文研究比较了几种酒曲制作甜米酒的效果：以不问形式的树舌各自与糯米混合发酵，获得较好的组合；比较不同树舌用量发酵米酒的效果，分析了树舌米酒发酵醪中糖度和酒度在发酵过程中的动态变化，对树舌米酒和普通米酒的成分进行了分析测定。结果表明，将树舌这种药用真菌与糯米以适当比例混合发酵可以充分利用甜酒酿中微生物的分解及合成作脂，酿制出保健树舌米酒。本项研究对进一步开发树舌类真菌资源，让传统的保健药用真菌以普通食品的菜式进入百姓生活提供了新的思路。     

树舌产糖培养基的选择及树舌粗多糖的纯化

分别用不同的培养基培养树舌,实验结果表明,合成培养基产糖量最高,树舌胞外多糖的产率为61.75mg/100 mL,胞内多糖的产率为0.51 mg/100 mL。树舌多糖纯化的最优纯化方案为:用1.5 g/50 mL活性炭进行脱色,按V(样品)∶V(三氯甲烷)∶V(正丁醇)=25∶5∶1的比例除蛋白,用1.5倍体积乙醇沉淀多糖。按优化的方案纯化树舌粗多糖,纯化后粗多糖中多糖的含量由21.6%上升为33.6%,多糖损耗率为52.7%。     

树舌灵芝总三萜提取工艺优化及其抗氧化作用研究

以树舌灵芝为原料,研究总三萜的提取工艺及其抗氧化性。选择料液比、乙醇浓度、超声温度和超声时间进行单因素实验,在单因素实验基础上,采用Box-Behnken试验设计,以树舌灵芝总三萜得率为响应值进行响应面分析,确定最优工艺参数为:料液比1∶20(g/m L),乙醇浓度70%,超声温度55℃,超声时间60 min。在此工艺条件下进行5次验证性实验,树舌灵芝总三萜的提取得率平均值为1.75%。并通过测定DPPH的清除率、羟基自由基的清除率以及总还原力,研究其抗氧化活性。     

富锗树舌胞外多糖的体外抗氧化活性研究

利用树舌为材料通过液体深层富锗培养获得富锗胞外多糖,测定了树舌富锗胞外多糖中锗含量及其抗氧化活性,即清除氧自由基、羟自由基、DPPH自由基、亚硝酸盐的能力和总还原力,并以维生素C(Vc)作为阳性对照。实验结果表明:树舌富锗培养基内锗质量浓度为150μg/mL时,可显著提高胞外多糖的产量,使胞外多糖产量达到1.12 g/L,比对照组提高36.62%。同时胞外多糖中的有机锗含量也得到显著提高达到0.26 mg/g,比对照组提高116.67%。有机锗对提高胞外多糖清除氧自由基、羟自由基、DPPH.、亚硝酸盐的能力及总还原力有显著的促进作用,在多糖浓度为2.5 mg/mL时,分别比对照提高25.52%、31.83%、26.95%、16.38%和10.36%。富锗树舌胞外多糖抗氧化活性与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系。     

树舌灵芝发酵特性的研究

研究了树舌灵芝摇瓶发酵过程中生物量、pH值、电导率、胞外粗多糖、纤维素酶活力的变化趋势。结果表明,在树舌灵芝发酵过程中,生物量和pH值均在5d后趋于稳定,电导率先下降3d后逐步上升,胞外粗多糖、纤维素酶活力均在3d时达最大值,此后逐渐下降,5d后基本趋于稳定。     

树舌灵芝菌丝体发酵工艺条件试验

树舌灵芝是灵芝属真菌中的一种,是我国中医药宝库中的珍贵药用菌,为寻求高产的生长条件和经济的培养基,进行了转速、温度、pH值、装瓶体积、接种量、碳源、氮源、C/N等单因素试验和多因素试验设计,利用菌丝体液体培养探索这些条件对菌丝体产量的影响.结果表明,菌丝生长的最适转速为150r/min,最适温度为25～30℃,最适pH值为5.5～6.5,最适装瓶体积为125ml,最适接种量为5ml/100ml;最适碳源为葡萄糖,最适氮源为米糠,最适C/N为25∶1.液体培养的最佳营养条件为:3%的葡萄糖,0.072%的KN03,0.02%的NaH2PO4,pH为8.5.通过生长曲线实验得出logistic方程:Y=0.616/(1 17.732e-8.874x),菌丝体干重达到500～700mg/100ml.     

树舌富锗深层培养研究

研究了不同浓度的锗对树舌液体培养生物量、菌丝体中有机锗、胞内多糖、腺苷及胞外多糖等主要活性成分含量的影响。结果表明,锗浓度在50~250μg/mL的范围内,对树舌菌丝体主要活性成分合成有很好促进作用,在锗浓度为250μg/mL时,生物量、有机锗、胞内多糖、腺苷均达最高,分别为15.44g/L、588μg/g、24.88mg/g、1.41mg/g,分别比对照组提高了33.1%、1267.4%、73.9%、101.4%。胞外多糖含量在锗浓度为150μg/mL时达到1.12g/L,比对照组提高了31.7%。