狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的改造及拯救

目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒。结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒。结论成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础。     

家庭花园每月作业(3月)

本月作业.撒除防霜用的遮盖物.宿根草花分株,开始施肥,移植小苗。撤除防霜用的遣盖物，进入3月，气候变化急剧．白天温度升高，可撤除防霜用的遮盖物，让新芽接受充足的光照。     

基于MasterCAM的自由曲面多轴数控加工的行距分析与控制

一般曲面零件的数控加工通常采用球头铣刀.球头铣刀加工曲面时多按行切法加工,即铣刀沿坐标轴方向或参数轴方向对曲面一行一行进行加工,每加工完一行后,铣刀移动一个行距,直至将整个曲面加工完毕.     

华丽清新的天鹅绒竹芋

天鹅绒竹芋(Calatheazebrina)又名斑马竹芋、斑叶竹芋、绒叶竹芋.竹芋科肖竹芋属植物,本属植物多分布于南美至中美的热带美洲地区,约有150种,许多种类为观叶花卉,其中天鹅绒竹芋是最著名的观叶种类之一,目前,在我国已广泛栽培应用.     

我国构建重组禽流感疫苗株

我国“863”计划现代农业技术主题——畜禽重大疫病新型疫苗的研制开发取得了重大突破，获得一批基因工程疫苗、核酸疫苗和分子免疫佐剂等，引导了新一代基因工程疫苗的发展方向。     

坚持科技创新 打造强势企业

介绍了株洲硬质合金集团有限公司推进科技创新的具体做法,取得的主要成绩,以及今后的努力方向。     

密螺旋体Reiter株轴丝的提纯及鉴定

将Reiter株菌体超声破碎,上清液经离子交换柱层析及凝胶过滤,得到纯化轴丝。该轴丝经SDS—PAGE检测分析,所得结果与丹麦参考品一致,分子量在3～4万之间,与文献报道相同。经电镜观察,产物均匀,未被杂质污染。按上述方法提取,3克湿重菌体最终可得2毫克左右轴丝蛋白。     

重组G145R HBsAg亲和纯化方法的建立及其应用

目的建立重组乙型肝炎病毒G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法。方法用抗-HBs单克隆抗体(D12- McAb)制备亲和层析胶,对2A8细胞(分泌G145R变异HBsAg)培养上清盐析物进行亲和纯化。采用SDS-PAGE、Western blot及ELISA,对纯化产物的纯度、特异性、含量和回收率进行鉴定,并与同法纯化的HBsAg阳性血清及r-wHBsAg提取物进行比较。结果D12-McAb对重组真核表达G145R变异HBsAg、HBsAg阳性血清及r-wHBsAS三者具有相似的亲和性,产物纯度分别为90.3%、95.2%和93.1%,回收率分别为43.3%、72.0%和66.4%。结论已成功地建立了重组G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法,为G145R变异以及其他HBV免疫逃逸变异感染的深入研究奠定了重要的技术基础。     

公式的行距

一般文字的排版通常都采用单倍行距,但每每遇到公式的时候行距往往会增大,如式（1）u（k）=u（k-1）＋K3∑i＋1w1i（k）xi（k）（1）疏密不匀的行距很不美观。这里介绍两种调整公式行距的方法。首先需要强调一点,公式应尽可能写成独立公式,单占一行。这时可以把公式的行距设为＂最小值0磅＂,如式（2）     

乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。