D-核糖高产菌株的选育及其生产性试验

BacillussubtilisJSIM 10 18菌株是 1株产D 核糖的莽草酸营养缺陷型突变株 ,以此菌株为出发菌株 ,通过甲基磺酸乙酯和紫外线连续、间断诱变处理 ,获得了 1株次黄嘌呤、莽草酸双重缺陷型突变株No .2 71菌株。该突变株摇瓶发酵的D 核糖平均产量为 10 8 1g/L ,比亲株提高了 15 8g/L。在 30 0 0 0L发酵罐中 ,连续 5罐批 ,平均产D 核糖 96 4 g/L ,最高为 98g/L ,比亲株提高了 16 2 5 g/L。     

非靶向代谢组学分析阿拉伯半乳聚糖对嗜黏蛋白阿克曼菌代谢物的影响

众多植物多糖中,阿拉伯半乳聚糖对嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,Akk)模式菌株(DSM 22959)的促生长效果最佳.为进一步探究阿拉伯半乳聚糖对Akk代谢物的影响,本研究将阿拉伯半乳聚糖作为部分碳源对Akk进行体外发酵培养,确定了阿拉伯半乳聚糖的补充量以便于Akk发酵液样本的后续分...     

泰山虫草菌丝体与冬虫夏草有效成分的TLCS分析

以腺苷、尿苷、次黄嘌呤核苷、虫草素及次黄嘌呤为指标,测定泰山虫草菌丝体与天然冬虫夏草中相应成分的含量,探索泰山虫草代替天然冬虫夏草开发药物或保健食品的可能性。采用80%乙醇超声提取,在GF254硅胶板上点样后,以薄层色谱扫描法(TLCS)测定上述各种成分的含量。首次证明泰山虫草菌丝体核苷类及次黄嘌呤等有效成分含量明显高于冬虫夏草。其腺苷、尿苷、次黄嘌呤核苷、次黄嘌呤含量分别是冬虫夏草的8.25倍、3.76倍、11.8倍和1.55倍。2种虫草中有效成分的含量均表现为尿苷>次黄嘌呤核苷>腺苷>次黄嘌呤>虫草素。说明泰山虫草可以作为冬虫夏草代用品进行综合开发利用。TLCS法简捷快速,重现性、稳定性良好,能有效地对虫草中的有效成分进行定性定量分析。     

肌苷发酵过程的动力学研究

采用枯草杆菌(Bacillus Subtilis)突变株,以葡萄糖为碳源进行间歇发酵研究,得到肌苷发酵过程受底物抑制的动力学关系。在肌苷代谢机理简化的基础上推导建立了工程上适用的菌体增殖动力学方程(dx)/(dt)=0.00266(Sx)/(20.3+s+s~2/76.4+I/6.03)肌苷生成的动力学方程为(dp)/(dt)=0.1791((Sx)/(67.76+s))-8.40(dx)/(dt)基质糖消耗的动力学方程为-(ds)/(dt)=(1/1.017)((dx)/(dt))+(1/0.1207)((dp)/(dt))+(0.3188x)     

电流型酶电极检测鱼具类新鲜度的方法研究

提出一种新的快速而又准确的检测鱼具类新鲜度的方法-电流型酶电极法。实验表明,在ＴＶＢ-Ｎ和次黄嘌呤（ＨＸ）的量之间有良好的相关性。ＴＶＢ-Ｎ是目前常规的国家检测标准因此,可将次黄嘌呤的量作为指标来判别鱼具类的新鲜度,新型的生物传感器快速检测很快可以取代繁杂的ＴＶＢ-Ｎ测定及细菌总数检测方法。     

用HPRT基因突变及CBMN研究AT细胞高辐射敏感性

研究了毛细血管扩张性共济失调症(Ataxia?telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)的高辐射敏感性。以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)为对照,利用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Hypoxanthinephospho?ribosyltransferase,hprt)位点突变分析技术及胞质分裂阻滞微核法(Cytokinesis?Blockmicronucleusmethod,CBMN),在AT细胞和GM细胞经Coγ射线0、1、2、3、4Gy60照射后,观察比较AT细胞和GM细胞之间hprt基因位点突变频率(hprtMF)、微核率(MNF)及微核细胞率(MNCF)的差异,并分别进行曲线拟合。在各剂量点,AT细胞hprt基因突变频率、微核率及微核细胞率均明显高于GM细胞,其差别具有显著性统计意义(p<0.01);AT和GM细胞hprt基因突变频率、微核率及微核细胞率均与照射剂量呈正相关,可拟合成剂量效应直线方程y=a bx。结果表明,毛细血管扩张性共济失调症患者AT细胞辐射敏感性显著高于GM细胞,具有高辐射敏感性。     

高效液相色谱法定量尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度

目的: 建立高效液相色谱法测定尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度。方法: 用Agilent ZORBAX SB-Aq column色谱柱,ZORBAX-Extend C₁₈预柱,以甲醇和 47 mmol/L KH₂PO₄水溶液作为流动相,流速:1.0 mL/min,检测波长为 260 nm。结果: 血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的线性范围分别是(1.667~166.667)×10³ ng/mL (r=0.9995)、(0.033~3.338)×10³ ng/mL(r=0.9994)和 (0.033~3.338)×10³ ng/mL (r=0.9996),日间与日内精密度均<15%。结论: 该法灵敏度高,精密度和准确度佳,能满足非布司他体内药效学研究。     

Nd(Ⅲ),Ce(Ⅲ)与5′-IMP配合物的合成及抗菌作用研究

以稀土硝酸盐、5′-次黄嘌呤核苷酸二钠盐(5′-IMP)为原料,制备了两种稀土配合物Nd(Ⅲ)-IMP与Ce(Ⅲ)-IMP。通过元素分析及ED-TA滴定确定了配合物的组成,并通过摩尔电导、IR、UV、TG-DSC的测定对配合物进行了表征。结果表明5′-次黄嘌呤核苷酸以嘌呤碱基上的N(7)原子分别与Nd(Ⅲ),Ce(Ⅲ)配位,其中磷酸根未参与配位,但可能形成氢键。将合成的固体配合物进行了抑菌试验,并与配体5′-IMP进行比较,结果表明两种配合物对金黄色葡萄球菌和肺炎球菌均有强抑制作用,而配体5′-IMP无抑菌作用。     

基于铜纳米簇模拟酶活性建立比色法测定鱼肉中的次黄嘌呤

基于铜纳米簇（copper nanoclusters,CuNCs）的过氧化氢（H2O2）模拟酶活性,建立鱼肉中次黄嘌呤（hypoxanthine,Hx）含量快速检测的比色分析方法。通过室温搅拌法得到半胱氨酸（cysteine,Cys）-CuNCs,利用透射电镜、光电子能谱、傅里叶变换红外光谱和荧光光谱,分别表征Cys-CuNCs的形貌、元素组成、表面官能团和发光特征。紫外-可见光谱实验表明,Cys-CuNCs能灵敏催化H2O2氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺显色,实现对H2O2含量的比色测定。在此基础上,利用Hx在黄嘌呤氧化酶的作用下生成H2O2,建立了一种检测Hx的比色分析方法。当孵育温度30 ℃、孵育时间1 h时,Hx浓度在4～100 μmol/L范围内与吸光度呈良好的线性关系,检出限为1.2 μmol/L。将该方法应用于鱼肉中Hx含量的测定,并通过与总挥发性盐基氮建立相关性,实现对鱼肉新鲜度的判断。     

次黄嘌呤核苷酸二钠盐纯度标准物质的研制

采用市售次黄嘌呤核苷酸二钠盐为原料,经重结晶纯化后研制呈味核苷酸标准物质,用红外光谱法和质谱法对纯化后的次黄嘌呤核苷酸二钠盐样品进行定性鉴定,用高效液相色谱法对纯化的核苷酸进行定量分析.探讨了高效液相色谱法分析次黄嘌呤核苷酸二钠盐的分离和检测条件.试验发现有机溶剂可以显著改善次黄嘌呤核苷酸二钠盐的出峰时间,酸度和盐离子浓度可以显著改善色谱的分离度.采用多家实验室联合分析的方法对标准物质进行定值,研制的次黄嘌呤核苷酸二钠盐标准物质的纯度为99.75%,定值结果不确定度为0.32%(k=2).