基于核Fisher判别分析的蛋白质氧链糖基化位点的预测

以各种窗口长度的蛋白质样本序列为研究对象,实验样本用稀疏编码方式编码,使用核Fisher判别分析(KFDA)的方法来预测蛋白质氧链糖基化位点。首先通过非线性映射(由核函数隐含定义)将样本映射到特征空间,然后在特征空间中用Fisher判别分析进行分类。进一步,用多数投票策略对各种窗口下的分类器进行组合以综合多个窗口的优势。实验结果表明,使用组合KFDA的方法预测的效果优于FDA和PCA以及单个KFDA分类器的预测效果,预测准确率为86.5%。     

糖基化对β-伴大豆球蛋白热聚集行为的影响研究(I)

基于Maillard反应的机理,采用干热法分别制备出7S和不同分子量葡聚糖(67 kD,150 kD、500 kD)的三种糖基化产物,从糖基化产物的热性质分析到热聚集体的浊度、粒径,研究了糖基化对于7S在pH和离子强度诱导下的热聚集行为.结果显示,糖基化具有抑制7s热聚集行为的作用,并且葡聚糖在分子量为67 kD和150 kD时的糖基化产物抑制效果相近且优于分子量为500 kD的葡聚糖糖基化产物.     

同时检测恩诺沙星和环丙沙星单克隆抗体的制备

为了产生同时检测恩诺沙星和环丙沙星的抗体,本研究采用戊二醛法制备突出恩诺沙星和环丙沙星共同结构的人工抗原。免疫Balb/c 小鼠的结果显示：使用糖基化载体所制备的免疫抗原,能够大幅提高所产生特异性抗体的滴度。通过细胞融合,筛选出一株对恩诺沙星和环丙沙星IC50 值分别为9.6ng/mL 和10.2ng/mL 的单克隆抗体。     

嗜热麦芽糖转葡萄糖基酶的制备及其应用综述

针对目前国内外关于嗜热麦芽糖转葡萄糖基酶的制备及应用进展进行了综述:主要采用基因克隆至常温宿主细胞中,通过宿主细胞的过量表达来完成制备,其应用主要体现在淀粉的优化改性、大环糊精的制备以及功能成分的糖基化修饰等方面.未来研究将集中于酶的多功能催化机制,同时拓展糖基化改性功能成分的种类及转糖基类型.     

杂合木聚糖酶的设计及在毕赤酵母中的表达

人工设计合成木聚糖酶,为木聚糖酶分子改造研究提供新思路。采用合成生物学思路,以黑曲霉XZ-3S木聚糖酶Xyn ZF-2基因序列为基础,将N端48个氨基酸替换成Ev Xyn11 N端的34个氨基酸;引入芳香族氨基酸P9Y和H14F;在C端引入二硫键Cys38-Cys191;α-螺旋及cord区域分别引入疏水性氨基酸K164M、G166A、N160I、V111A以及G109A,设计杂合酶Xyn ZL。基因全合成后,构建毕赤酵母重组表达质粒p PIC9K-ZL,将其转化酵母菌GS115,对工程菌GS115-XynZL进行单因素发酵条件优化及重组酶酶学性质测定。最佳发酵培养基为土豆培养基,最佳诱导温度为28℃,最佳种龄为20 h,最佳诱导时间为168 h,最佳诱导起始pH值为6. 5,甲醇诱导最佳体积分数为15 mL/L。重组酶酶学性质显示:最佳反应温度为55℃,最适pH值为5. 0,杂合酶Xyn ZL在毕赤酵母中表达后具有特定性质和功能,其设计方法拓宽了木聚糖酶分子改造研究的思路。     

转谷氨酰胺酶催化的糖基化修饰对黑豆蛋白抗氧化活性的影响

以DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、总还原能力、总抗氧化能力、清除亚硝酸盐能力作为评价指标,比较了酶法糖基化黑豆蛋白、湿热法糖基化黑豆蛋白、黑豆分离蛋白、自交联黑豆蛋白和Trolox的抗氧化能力,结果表明:酶法糖基化黑豆蛋白、湿热法糖基化黑豆蛋白以及Trolox抗氧化能力均高于自交联黑豆蛋白以及黑豆分离蛋白,其中酶法糖基化黑豆蛋白以及Trolox的抗氧化能力强于湿热法糖基化黑豆蛋白。     

乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性

以褐变程度及抗氧化活性为检测指标,研究湿热反应条件对乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性的影响。研究结果表明:反应物浓度越大,反应温度越高,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度越大,抗氧化活性越强;起始反应pH值越大,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度及还原能力越强,而其DPPH.清除能力呈现先升高后降低的趋势。当反应物浓度为6%,温度为100℃,起始反应pH值为9时,所获得的乳清蛋白糖基化产物抗氧化活性较强。     

糖基化反应条件对乳清蛋白——麦芽糖复合物抗原性的影响

研究了将麦芽糖通过糖基化引入到乳清蛋白制备乳清蛋白-麦芽糖,用间接竞争ELISA法测定不同反应时间不同质量比的乳清蛋白-麦芽糖中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性的变化。结果表明,糖基化能有效降低α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性,α-乳白蛋白的抗原性可以从26.2 mg/L降低到14.4 mg/L,β-乳球蛋白的抗原性可以从95.1 mg/L降低到22.4 mg/L。反应时间对不同质量比的乳清蛋白-麦芽糖中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性有较大影响。蛋白与糖的质量比为1～8时,反应相同时间的乳清蛋白-麦芽糖中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性随蛋白与糖的质量比的下降而下降。     

喷射蒸煮水热处理提升大豆分离蛋白乳化性的研究

该文使用喷射蒸煮水热反应器进行大豆蛋白糖基化反应,在高温、高压的水热条件下,蛋白质与小分子单糖及双糖进行Mailard反应,生成共价复合物.结果显示生成的复合物比大豆蛋白乳化活性有所提升,其在高温、高盐的条件下乳化活性的变化较小.     

凝乳酶水解酪蛋白生产酪蛋白糖巨肽工艺条件的研究

酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,简称CGMP)是K-酪蛋白经酶解后生成的一类舍有糖链的多肽,具有许多功能特性.本文研究了凝乳酶水解酪蛋白生产CGMP的工艺条件,通过正交实验得到最佳工艺条件是底物浓度10mg/mL、酶的添加量为0.6%、酶解时间为2.5h.唾液酸回收率为80.7%,蛋白质回收率为3.03%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为77.6μg/mg.