一种5 重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立

以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象，利用5 种不同的荧光信号（FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5）进行多重实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction，real-time PCR）检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验，建立了5 重real-time PCR方法，灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点，可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。     

靶向抗癌药格列卫与其治疗白血病疗效监测

Gleevec是抑制致癌的融合蛋白BCR-ABL的一种分子靶向治疗药物,BCR-ABL是一种与慢性髓细胞性白血病(CML)有关的酪氨酸激酶抑制剂。用Gleevec选择性地抑制BCR-ABL活性在治疗CML中显示出很好的效果,特别是在CML慢性期,因此,监测疗效非常重要。现就Gleevec的研究进展及如何监测其在CML中的疗效作一简单综述。     

甲型肝炎病毒(L-A-1株)基因型分析

目的 分析甲肝病毒基因型,为确定我国甲肝的分子流行病学及疫苗的安全性和免疫原性奠定基础。方法 采用抗原捕获聚合酶链反应（AC/PCR）,依据国际上甲肝病毒分型标准,扩增VP1/2A结合处的168个核苦酸（nt2909～3264）。结果 经生物信息学软件分析,得出L-A-1株病毒属于甲肝病毒基因IB亚型。结论 在我国有IA和IB两个亚型甲肝病毒流行。     

重组Thermus thermophilus DNA聚合酶表达纯化及其在RT-PCR中的应用

目的研究重组ThermusthermophilusDNA聚合酶的表达、纯化和应用。方法提取Thermusthermophilushb8基因组DNA作为模板,PCR扩增TthDNA聚合酶基因后,克隆至pET28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,用His-BindQuickCartridge300纯化重组TthDNA聚合酶His-tag融合蛋白。提取Thermomonosporafusca总RNA,用一管法RT-PCR扩增E2cd基因,检测重组TthDNA聚合酶RT-PCR活性。结果大肠杆菌表达TthDNA聚合酶,分离出的电泳纯重组TthDNA聚合酶His-tag融合蛋白相对分子质量为94000,表达产量为200000U/L。一管法RT-PCR可扩增出850bp长度的E2cd基因。结论重组TthDNA聚合酶已成功地表达和纯化,并用于RT-PCR。     

应用HEV RNA RT-PCR诊断戊型肝炎的研究

根据我国HEV基因序列分析，设计引物，检测临床上可疑HE患者25例，82份样品。在患者血清及粪便样品中，HEVRNA的阳性率分别为77．78％和63．16％；临床诊断为HE的20例患者，HEVRNA全为阳性，5例抗HEV阴性而未分型的患者，HEVRNA也为阳性。血中HEVRNA可持续90天，粪便中可持续33天。     

基于虚拟仪器的PCR芯片智能温控系统开发

采用检测电路与加热电路分时交替工作的方式,利用精密恒流源以电阻值测温度值.采用基于模糊切换的Bang-Bang控制、自适应模糊控制、微分先行PID控制相结合的分段复合控制策略,应用虚拟仪器技术,开发了PCR芯片智能温度控制系统.实验结果表明,此温度控制系统可对被控对象进行精确有效的控制,充分满足了使用要求.     

基于多温度信息融合的PCR仪

本系统采用双卡尔曼滤波器算法对多通道的试剂热辐射、环境温度和热源温度数据进行信息融合从而估计出多通道试剂表面温度的真实值,有效克服热成像仪的缺点.算法结合了迭代扩展卡尔曼滤波器(IEKF)非线性估计收敛快与线性卡尔曼滤波器(KF)实时性高的优点,实现了多通道实时滤波与温控.实验表明,滤波估计后的红外热成像仪可使误差由2℃降低到0.3℃;聚合酶链式反应(PCR)测试结果较为满意,恒温时间设置更加合理.     

集成型PCR芯片的研究

PCR芯片的温度控制部分的搭构是决定整个PCR芯片性能、尺寸、集成性的重要组成部分。利用薄膜技术与MEMS技术,将热电材料依照珀尔帖模型排列组合制作于微结构PCR芯片的反应室底部,可实现对反应室升温及降温的操作,并可通过改变电流方向,方便实现两者的切换,制作出集成了DNA反应室、温度传感器以及热电材料温控组件的集成型微结构PCR芯片。     

PCR生物芯片/微装置在微生物检测中应用研究

聚合酶链式反应(PCR)技术已经在分子生物学、生物化学、临床医学、遗传以及法医等领域得到广泛的应用.基于微电子机械系统技术开发而成的PCR生物芯片由于具有所需样品和反应混合物体积小、反应时间短、轻便等优点而日益受到人们的重视.介绍PCR生物芯片/微装置(包括反应池内固定扩增式和连续流动式)在微生物埃希氏大肠杆菌(E.coli)和微生物战剂检测中的应用.