非血红素铁模型配合物[Fe~(Ⅳ)(O)(N4Py)]~(2+)的磺化氧化反应机理

利用密度泛函理论研究了4价非血红素铁模型配合物[Fe~(Ⅳ)(O)(N4Py)]~(2+)的磺化氧化反应机理。选取苯硫基甲烷及其对位衍生物为反应底物,苯硫基甲烷对位取代基的吸电性越强,硫原子的Mulliken电荷数就越大。磺化氧化反应的反应机理是在反应过程中发生了直接的两电子转移。氧转移反应为两态反应,反应活性主要由五重态的反应能垒决定。通过计算可知,对位取代基的吸电性越强,其反应能垒就越高,反应活性顺序由高到低依次为对甲基苯硫基甲烷、苯硫基甲烷,对氯苯硫基甲烷、对氰基苯硫基甲烷、对硝基苯硫基甲烷。     

大气混合污染物对大鼠肺脏中血红素氧合酶1表达的影响

通过观察大气污染物引起大鼠肺损伤的病理组织学变化,分析肺组织内血红素氧合酶1（HO-1）的表达量的变化,为大气污染所致肺损伤的生物学标记物的研究提供科学依据。实验方法如下：将30只Wistar大鼠,随机分为3个实验组（3d、7d、30d组）和3个对照组（3d、7d、30d组）,对实验组大鼠染尘染毒后提取所有大鼠肺组织,观察其病理组织学变化;RT-PCR技术检测各组肺组织中HO-1的mRNA表达;Western-blot技术检测各组肺组织中HO-1蛋白的表达。结果显示：实验组（7d及30d）的肺组织病理形态学评分显著高于对照组（7d及30d）,实验组（7d及30d）大鼠肺组织HO-1mRNA表达与对照组相比,具有显著性差异（P均〈0.05）。随着吸入大气混合污染物的时间延长,肺组织内的HO-1蛋白表达水平逐渐增高,实验组（7d及30d）与对照组（7d及30d）相比,差异有显著性意义（P〈0.05）。在吸入大气混合污染物后早期（7d）,HO-1转录水平升高。持续吸入混合大气污染物（30d）,大鼠肺组织出现明显的病理组织学变化,HO-1转录水平、蛋白表达水平均比对照组明显升高。得出结论：可将HO-1作为大气混合污染物所致的肺损伤的早期生物学标记物;采取某些手段增加肺组织HO-1的表达,可能会减少混合大气污染物对肺组织造成的损伤。     

新型过氧化物酶荧光底物的合成及其性能的研究

合成了辣根过氧化物酶的５种荧光底物，它们分别是：Ｎ，Ｎ′—二氰甲基邻苯二胺（ＤＣＭ－ＯＰＡ），３，４—二氧喹喔啉－２（１Ｈ）－酮（ＤＨＱ），３－甲基－３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮（ＭＤＨＱ），３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮－６－羧酸（ＤＨＱ－６－Ａ）及３－甲基－３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮－６－羧酸（ＭＤＨＱ－６－Ａ）。其中荧光底物ＤＣＭ－ＯＰＡ，ＤＨＱ和ＭＤＨＱ都可以很容易地进行大量纯品的制备。我们用流动注射分析法对合成底物和已有的最佳荧光底物在ＨＲＰ及其模拟酶氯化血红素催化体系中的性能进行了比较研究。结果表明，ＤＣＭ－ＯＰＡ和ＭＤＨＱ是合成的５种底物中最好的两个，而对羟基苯丙酸（ｐ－ＨＰＰＡ）和对羟基苯乙酸（ｐ－ＨＰＡ）优于高香草酸（ＨＶＡ）和酪氨。底物ｐ－ＨＰＰＡ和ｐ－ＨＰＡ与合成底物ＤＣＭ－ＯＰＡ和ＭＤＨＱ体系在对过氧化氢的分析方法性能相当，最低检测限都在１～１０ｎｍｏｌ／Ｌ之间。对酶的检测，ＤＣＭ－ＯＰＡ是所有研究的底物中最灵敏的，上述两种合成底物保存在４℃的冰箱中都可以稳定一个月以上。     

microRNA-1304通过靶向血红素氧合酶-1对人肺癌细胞的抑制作用

目的:探讨miR-1304对肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制。方法:应用实时定量PCR检测miR-1304在不同转移能力肺癌A549和NCI-H1975细胞中的表达水平;脂质体2000介导分别转染miR-1304类似物和抑制物入A549 和 NCI-H1975细胞;应用MTT法和细胞集落形成实验分别检测miR-1304对肺癌细胞增殖活性的作用及生长抑制作用;细胞凋亡和细胞周期分别采用膜联蛋白V-PE/7-AAD和PI染色分析进行检测。双荧光素酶报告基因验证miR-1304是否作用于血红素氧合酶（heme oxygenase-1,HO-1） mRNA的3'UTR区预测靶位;Western blot检测HO-1蛋白水平。结果:miR-1304高表达可显著抑制肺癌细胞形成的数量和生存能力,以及诱导细胞凋亡和G0/G1期细胞周期阻滞。体外侵袭实验及细胞增殖实验结果显示,miR-1304可抑制肺癌细胞侵袭和增殖;经双荧光素酶报告基因验证HO-1是miR-1304的靶基因。结论:miR-1304在肺癌中表达,通过直接作用于HO-1可抑制肺癌细胞的侵袭和增殖,miR-1304是肺癌的一个潜在治疗靶点。     

柳蒿芽对小鼠免疫功能的影响

目的:定性分析柳蒿芽主要有效成分,并研究柳蒿芽对小鼠免疫功能调节的效应.方法:通过中草药经典的定性实验方法,用不同极性的溶液浸提后进行试管反应,确定柳蒿芽中大致含有的有效成分.采用 BABL/C小鼠,不同剂量的柳蒿芽提取物干预后,通过碳粒廓清实验、鸡红细胞免疫、刀豆蛋白A诱导淋巴细胞增殖实验,评价柳蒿芽调节的免疫功能.结果:柳蒿芽中主要化学粗成分有生物碱、有机酸、蛋白质、多糖、黄酮类等物质.正常对照组比较,柳蒿芽提取物高剂量组可以提高小鼠碳粒廓清指数κ(p＜0.01)和吞噬指数α(p＜0.01),提示柳蒿芽提取物可增强正常小鼠巨噬细胞吞噬能力,表明它能够增强小鼠的非特异性免疫功能.柳蒿芽提取物中、高剂量干预下的小鼠血清溶血素水平、淋巴细胞增殖能力明显高于正常对照组(p＜0.01),提示柳蒿芽提取物可以通过提高血清溶血红素水平和增强淋巴细胞增殖能力来增强小鼠的特异性免疫功能.结论:柳蒿芽提取物有增强小鼠非特异性免疫应答和特异性免疫应答的作用,可增强小鼠的免疫系统功能.     

超声波激励法改进合成[2,7,12,18-四甲基-3,8-二(-1-羟基乙基)-13,17-二甲氧基羰基乙基]-卟啉

以氯化血红素(1)为原料,经过加成和取代反应制得血卟啉(2)。然后在超声波激励下,以血卟啉(2)作为原料,浓硫酸作为催化剂,甲醇既作溶剂又作反应剂,合成了[2,7,12,18-四甲基-3,8-(-1-羟基乙基)-13,17-二甲氧基羰基乙基]-卟啉(血卟啉二甲酯,3),两步反应总产率达到74.8%。探讨了反应时间、催化剂用量以及超声功率对血卟啉二甲酯(3)合成的影响,并且将超声波激励法与加热搅拌法进行了比较。实验结果表明,同加热搅拌法相比,超声激励法反应时间更短,产率更高,副产物更少。产物结构通过1 H NMR、MS和IR测试技术进行了表征。     

重组血红素加氧酶在大肠杆菌中的表达

将已构建好的血红素加氧酶-1(HO-1)的重组质粒ho-1-pCAGG转入大肠杆菌BL-21,分析温度与时间对HO-1表达的影响,确定表达最佳条件.使用SDS-PAGE,Western Blot检测酶表达.将ho-1-pCAGG质粒转染真核细胞,筛选稳定转染的真核细胞,检测细胞凋亡等一些生理现象的变化.最终确定了HO-1表达最佳条件为37℃,表达16 h.检测确定血红素加氧酶-1在原核细胞中有表达.     

活性酶血红素面包防治青少年缺铁性贫血研究

用生物活性酶化溶解法,使猪血中红血球裂解,转化成活性酶化血红素,将它与VC、VB,同时加入饲料进行小白鼠喂养试验,一定时间后与对照组血红蛋白进行比较,结果有显著性差异(T值3.72,P＜0.001);解剖并称量其胸腺,实验组比对照值重6.0 mg;同时把活性酶血红素加入面包中,让小学生连续服用20～40 d,服用后与服用前血红蛋白进行比较结果有显著性差异(T值7.41,P＜0.001).     

猪肉的色泽

猪肉的色泽樊子文（安徽省滁县地区肉联厂，２３９０００）在日常屠宰加工或冷冻贮存的猪肉，其肌肉的红色深浅不一。如肥猪肉与瘦猪肉，放牧的猪肉与圈养的猪肉，鲜猪肉与冷冻猪肉，刚宰杀的猪肉与冷却后的猪肉，放血良好的猪肉与放血不良的猪肉，其色差显著。有时，同一...     

铁强化果冻的工艺研究

以猪血为原料,用蛋白酶水解蛋白质,分离后得到血红素铁溶液,并配辅料,研制铁强化果冻。最佳配方为:血红素铁溶液50％,蔗糖8％,卡拉胶0.7％,柠檬酸0.16％等。