海湾扇贝部分细胞免疫功能初步研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜技术对海湾扇贝(Argopecten irradians)血细胞与细胞免疫功能进行了初步研究。结果表明,健康扇贝血淋巴中血细胞的平均密度为(3.75±0.65)×107cell/ml,病贝为(3.16±0.38)×107cell/ml。颗粒细胞中的颗粒可分成三种类型:Ⅰ型颗粒、Ⅱ型颗粒和Ⅲ型颗粒。用APIZYM试剂盒在健康扇贝血浆中检测到14种酶,在血细胞中检测到12种酶。血细胞对大肠杆菌和对RLO的吞噬率分别为31.36%和24.17%。颗粒细胞的吞噬活性(41.34%~48.62%)大于透明细胞的吞噬活性(9.26%~11.22%)。病原菌感染和温度、盐度等环境胁迫因素对血细胞的吞噬活性具有不同程度的影响。本文首次对海湾扇贝细胞免疫功能作较系统的报道。     

利用AFLP技术研究海湾扇贝不同养殖群体的遗传结构及其分化

采用AFIP分子标记技术对我国海湾扇贝的4个不同地理群体共80个个体利用7对引物组合进行了遗传多样性分析。4群体的多态位点比例分别为：加拿大养殖群体48．8235％,墨西哥湾养殖群体49．2914％,秦皇岛养殖群体38．2353％,浙江养殖群体41．1765％。平均杂和度分别为0．1878,0．1886,0．1265和0．1618。遗传距离介于0．1188～0．0941之间。4个群体的Fst为0．1883。根据遗传距离绘制了UPGMA聚类图。4个群体间的遗传关系如下：加拿大群体和浙江群体聚为一支,墨西哥湾群体和秦皇岛群体聚成一支,最后这两支聚在一起。试验结果表明,经过长时间累代养殖的浙江、加拿大、墨西哥湾群体仍保持较高的杂合度,与引种时间最短的(2年)、最为接近美国自然群体的秦皇岛群体比较,以上3个群体没有出现多态位点比例和杂合度显著下降的现象。     

海湾扇贝g型溶菌酶基因cDNA的克隆与分析

通过EST和锚定PCR技术,从海湾扇贝(Argopecten irradians)中克隆得到一种溶菌酶基因的全长cDNA(全长659bp,编码200个氨基酸)。BLASTx分析的结果显示,它和脊椎动物g型溶菌酶相似性较高,却不同于无脊椎动物中已发现的c型和i型溶菌酶。在其编码的氨基酸序列中发现了g型溶菌酶的活性中心(Glu82,Asp97,Asp108),同时6个保守的半胱氨酸也与鸟类和鱼类的g型溶菌酶相一致。结合BLASTX分析的结果,可以确认所获得的cDNA序列是一种在无脊椎动物中首次发现的g型溶菌酶的编码序列。采用Clustalw软件,对多种脊椎动物c型、g型溶菌酶和无脊椎动物c型、i型溶菌酶以及本研究发现的无脊椎动物g型溶菌酶进行了分析,结果发现,无脊椎动物c型、i型溶菌酶和脊椎动物c型溶菌酶同源性较高,而海湾扇贝g型溶菌酶和脊椎动物g型溶菌酶同源性较高。由此说明c型、g型溶菌酶从无脊椎到脊椎动物的进化是平行发生的,这对进一步研究溶菌酶及其分子进化具有重要意义。     

生物保鲜剂对冷藏条件下海湾扇贝品质变化与生物胺相关性的研究

将海湾扇贝(Argopectens irradias)经生物保鲜剂处理后在4℃和0~-1.6℃条件下贮藏,通过研究其在贮藏过程中感官品质、菌落总数、挥发性盐基氮、K值以及生物胺等指标的变化,以探求海湾扇贝的生物胺与腐败指标之间的相关性。结果表明:随着贮藏时间的延长,海湾扇贝的菌落总数、TVB-N、K值均呈现上升趋势,但低温贮藏和经保鲜剂处理后的样品各指标上升速率减缓;同时低温和生物保鲜剂均可抑制7种生物胺的产生,其中对腐胺和尸胺抑制效果显著(P0.05),对其余五种生物胺抑制效果不显著(P0.05)。海湾扇贝在冷藏过程中变化最显著的生物胺是腐胺和尸胺,且腐胺和尸胺与其他评价指标在0.05水平上显著相关,因此,尸胺和腐胺可作为海湾扇贝品质判定的指标,其含量变化可客观反映海湾扇贝的腐败变质进程。     

即烹扇贝冷冻预制菜的质构特性及营养品质评价分析

目的 探讨即烹扇贝冷冻预制菜的质构特性和营养价值。方法 采用不同熟化方式对3种扇贝冷冻预制菜(蒸蒜蓉扇贝、香煎扇贝、烤扇贝)进行处理, 分析熟化后的质构、色差、微观结构、基本营养成分、氨基酸及脂肪酸组成与生扇贝及煮扇贝的差异, 采用相关性分析及主成分分析综合评价扇贝预制菜品质。结果 扇贝冷冻预制菜熟化后硬度、弹性和咀嚼性均显著性增加, 但蒸蒜蓉扇贝和烤扇贝的质构指标均低于煮扇贝和香煎扇贝, 后者肌肉纤维排列更紧密;香煎扇贝、烤扇贝和蒸蒜蓉扇贝的白度值均显著低于煮扇贝和生扇贝; 熟化后扇贝均具有高蛋白低脂肪的特点, 蛋白质含量为20.68~29.79 g/100 g, 粗脂肪含量为0.50~2.26 g/100 g; 氨基酸组成合理, 脂肪酸组成丰富, 必需氨基酸含量在22.05~31.07 g/100g, 烤扇贝具有较高的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸含量; 主成分分析营养价值由高到低为香煎扇贝>烤扇贝>蒜蓉扇贝>煮扇贝>生扇贝。结论 即烹扇贝冷冻预制菜熟化后营养全面, 香煎扇贝质构及营养价值综合评价较高, 本研究为后续开发扇贝产品提供了理论数据。     

海湾扇贝酶解产物清除自由基活性的研究

利用双酶(胰酶0.3%和枯草杆菌中性蛋白酶0.8%)。在50℃、pH值7.0～8.0、料水比1:3的条件下,对海湾扇贝肉酶解4h后制备得到产物.该酶解产物对羟自由基的清除活性IC_(50)为2.01 mg/mL,对超氧阴离子的清除活性IC_(50)为9.54 mg/mL,对DPPH自由基的清除活性IC_(50)为5.90 mg/mL。Sephadex G-15(1.6 cm×68 cm)凝胶色谱结果表明,该酶解产物中分子质量分布在1450～288 u,肽链长度在13.2～2.6的组分具有较强的清除羟自由基和DPPH自由基活性。     

栉孔扇贝和海湾扇贝病原体感染与疾病发生关系探讨

超薄切片和负染色技术检测栉孔扇贝和海湾扇贝病原体感染状况，结果表明：在栉孔扇贝大规模死亡的7、8月份，病毒检出率分别为80％、100％，此时，病毒感染强度也达到最高；而海湾扇贝整个养殖期间病毒感染率和感染强度均维持在较低的水平，未出现明显的涨落。二种扇贝均检测到类立克次氏体（RLO），但类立克次氏体的感染率和感染强度均未出现明显的涨落，似与扇贝死亡的关系不大。综合分析认为，病毒极可能是导致栉孔扇贝大规模死亡的直接病原。