蛤蟆油水溶性总蛋白对小鼠耐缺氧及抗氧化能力的影响

目的:研究蛤蟆油水溶性总蛋白对小鼠耐缺氧和抗氧化能力的影响。方法:记录小鼠在常压耐缺氧、亚硝酸中毒、急性脑缺血性缺氧实验中的存活时间,测定过氧化损伤模型中小鼠肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化。结果:蛤蟆油水溶性总蛋白可明显地延长亚硝酸中毒、急型脑缺血性缺氧所致小鼠存活时间,对小鼠常压耐缺氧的存活时间无明显的影响。蛤蟆油水溶性总蛋白能显著降低肝脏和血液中丙二醛(MDA)含量,提高肝脏和血液中超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结论:说明了蛤蟆油水溶性总蛋白具有耐缺氧和抗氧化的作用。     

利用线粒体DNA上的cytB鉴定林蛙及林蛙油

目的：以线粒体DNA上cytB为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)手段,建立林蛙及林蛙油鉴定方法。方法：采用市售成年雌蛙的新鲜组织和林蛙油为实验材料,通过试剂盒提取总DNA;以已报道的东北林蛙、中国林蛙、黑斑蛙和蟾蜍的cytB为模板,设计四对引物;PCR扩增产物回收测序。结果：仅东北林蛙引物的PCR体系获得1100 bp左右大小的产物,产物序列与东北林蛙cytB序列一致性为99%,说明实验对象林蛙为东北林蛙,林蛙油来源为东北林蛙。讨论：利用mtDNA独特的优势,应用PCR扩增cytB,并测序确定了林蛙品种,建立了林蛙种属以及林蛙油基源的鉴定方法,为林蛙油类药材的鉴定提供科学理论依据。     

林蛙油及其酶解液抗氧化活性的研究

通过小鼠林蛙油喂养实验可以发现,林蛙油具有明显的提高超氧化物岐化酶、过氧化氢酶、谷光甘肽酶的活性,且1%酶解液可明显减少鼠体内的MDA、NO水平。所以,林蛙油有抗氧化作用。     

蛤蟆油水溶性总蛋白药理作用研究

目的:研究蛤蟆油水溶性总蛋白耐缺氧、抗疲劳及辅助降血脂功效学作用。方法:测定小鼠常压耐缺氧存活时间、体重变化和负重游泳时间,酶联法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标含量。结果:蛤蟆油水溶性总蛋白能显著延长常压耐缺氧存活时间(P<0.05),延长小鼠负重游泳时间,显著降低血清总胆固醇、甘油三酯含量(P<0.05)。结论:蛤蟆油水溶性总蛋白具有耐缺氧和辅助降血脂作用。     

不同地区林蛙油无机元素及重金属元素含量特征分析

通过测定林蛙油中12种无机元素和重金属元素的含量,对其质量和食用安全进行评价.试验采用原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体质谱法对11个不同地区的林蛙油样品中Zn、Fe、Cu、Mn、As、Se、Pb、Cd、Hg、K、Na、Mg 12种元素进行了定量分析,并运用SAS统计分析软件进行元素及产地聚类分析.定量分析结果表明,林蛙油中含有丰富的无机元素,其中K、Na、Mg含量最高,达到了百分含量级别,为0.045%~1.48%;Fe、Mn、Zn、Cu含量次之,为7.4 mg/kg^59.5 mg/kg;Se含量为0.38 mg/kg^0.47 mg/kg;林蛙油中重金属Pb、Cd、Hg、As含量较低,均未超出标准GB/T 19507-2008《地理标志产品吉林长白山中国林蛙油》规定的限量值.聚类分析结果表明,林蛙油中各种元素含量存在较大差异,但含量相近或是相邻地区的能聚为一类.     

凝胶电泳分离-液相色谱-质谱法分析林蛙油及其伪品中的特异性蛋白

本研究应用凝胶电泳分离、蛋白酶酶解、纳升液相色谱分离、串联质谱检测、数据库检索等技术,建立了林蛙油及伪品青蛙输卵管、牛蛙卵巢、牛蛙输卵管和明太鱼输卵管中特异性蛋白的鉴定方法。根据定性肽段数量、肽段的响应高低,蛋白在电泳图谱中条带位置的特异性等因素综合判断,筛选出林蛙油及其相关伪品的特异性蛋白,通过对特异性蛋白的分析测定,判断样品的真伪。采用该方法对市场上的4种林蛙油产品进行检测,通过分析特异性蛋白,发现所检测的样品均为林蛙油伪品。研究结果表明,利用凝胶电泳分离液相色谱质谱法构建的特异性蛋白识别技术可以有效检测林蛙油产品的真伪。     

哈蟆油水溶性总蛋白抗疲劳活性的研究

研究了哈蟆油水溶性总蛋白的抗疲劳药理活性。采用中性缓冲液浸提,硫酸铵沉淀法制备哈蟆油水溶性总蛋白。设立哈蟆油水溶性总蛋白低、中、高三个剂量组（0.075、0.15、0.30g/kg）,同时设立空白对照组,小鼠灌胃给药30d。观察小鼠体重、负重游泳时间、尿素氮含量、肝糖原含量、血乳酸含量等指标的变化。实验结果表明,哈蟆油水溶性总蛋白可延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量,显著增加肝糖原含量,显著降低血乳酸含量,对小鼠的体重无明显影响。证明了哈蟆油水溶性总蛋白具有一定的抗疲劳作用。     

木瓜蛋白酶作用于林蛙油蛋白质水解功能特性的研究

本研究以林蛙油为底物,加酶水解,实验确定林蛙油水解最适宜的酶制剂为木瓜蛋白酶。与林蛙油相比,水解产物具有很好的溶解性,游离雌二醇含量随水解程度的增加而增加,粘度随水解程度的增加而降低。     

蛤蟆油非水溶性成分酶解物药理活性研究

目的:研究蛤蟆油非水溶性成分酶解物的抗疲劳、耐缺氧及降血脂作用。方法:测定小鼠体重、负重游泳时间、血乳酸含量(LAC)及常压耐缺氧时间;酶法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量等指标。结果:蛤蟆油非水溶性成分酶解物能显著延长受试小鼠常压缺氧下存活时间及负重游泳时间,显著降低其血乳酸含量(P<0.05);能显著降低大鼠TC、TG含量(P<0.05)。结论:蛤蟆油非水溶性成分酶解物具有抗疲劳、耐缺氧及降血脂的作用。     

正交试验优化哈蟆油蛋白双酶法水解工艺

目的：考察双酶法制备哈蟆油蛋白的最佳工艺。方法：以哈蟆油为原料,采用柠檬酸浸提和水煎煮的方法提取哈蟆油蛋白,先后加入胃蛋白酶和碱性蛋白酶进行酶解,根据酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量分布,应用单因素和正交试验确定哈蟆油蛋白酶解的最佳条件。结果：最佳酶解条件为胃蛋白酶与底物比（m/m）1∶2 000、酶解时间2 h、碱性蛋白酶与底物比（m/m）1∶100、酶解时间6 h,酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量小于5 000所占的比例为94.85%,哈蟆油蛋白中蛋白质含量为49.85%。结论：胃蛋白酶与碱性蛋白酶结合使用可以有效地降低哈蟆油蛋白的相对分子质量,利于人体吸收。