基于高压结合酶法制备的低敏虾制品体内体外致敏性检测的差异性分析

采用高压结合酶法处理凡纳滨对虾的虾蛋白、虾仁泥（虾肉）和虾仁,获得3 种低敏虾制品;采用酶联免疫吸附法检测3 种虾制品的过敏原性,采用全身性过敏反应（过敏性休克模型）及致敏离体回肠平滑肌收缩实验（Schultz-Dale反应）检测3 种低敏虾制品的致敏性,以分析体内与体外方法检测虾制品致敏性的差异性。结果显示：处理前的3 种原料过敏原性极高。经高压结合酶法处理的虾蛋白、虾肉和虾仁的过敏原性分别消减97.0%、94.1%和94.5%。而在动物实验中（以磷酸缓冲盐溶液为阴性对照,未处理虾蛋白为阳性对照,以豚鼠为受试对象）,未处理虾蛋白组的过敏反应发生率与死亡率均为100%,3 种低敏虾制品的过敏反应发生率也为100%,死亡率分别为16.7%（虾蛋白产物）、50%（虾肉产物）和83.3%（虾仁产物）。致敏的离体回肠受到3 种低敏虾制品攻击后,收缩力也明显增强,分别达到376.9%、766.2%和1 004.4%。上述结果表明,对高压结合酶法制备的低敏虾制品过敏原性的检测,体外检测与体内检测存在一定的差异性。     

鸡卵类黏蛋白过敏原性的在体与离体实验

通过观察卵类黏蛋白引起的豚鼠过敏性休克以及对致敏豚鼠离体肠平滑肌过敏性收缩反应（Schultz- Dale反应）的影响,研究鸡卵类黏蛋白的过敏原性,并初步建立其过敏实验的动物模型。结果显示：1）在实验 观察剂量下,1 mg/mL卵清白蛋白组豚鼠100%出现过敏性休克并死亡,全身性过敏反应呈极强阳性（4 分）; 卵类黏蛋白组豚鼠的反应与卵白蛋白组相似（P＞0.05）,大部分动物出现死亡,全身性过敏反应100%呈阳性 （2.04～3.68 分）;不同剂量的卵类黏蛋白引起的豚鼠全身过敏反应呈现出剂量依赖性,当致敏剂量为4 mg/mL 时,全身性过敏反应评分为3.68。2）卵类黏蛋白对Schultz-Dale反应的影响也与卵清白蛋白相似,使致敏的肠平滑 肌收缩活动明显加强;以2 mg/mL致敏时,豚鼠离体肠收缩力改变率最高,为538.5%。3）不同致敏剂量卵类黏蛋 白组豚鼠血清免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G水平较对照组明显升高,且呈剂量依赖性。由此建立的卵类黏 蛋白在体与离体过敏实验的动物模型可用以检测卵类黏蛋白过敏原及评价其过敏原的消减效果。     

虾蛋白过敏实验动物模型的建立

以卵白蛋白为阳性对照,以平衡盐溶液(PBS)为阴性对照,观察虾蛋白的全身过敏反应。同时,观察虾蛋白对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩反应(Schultz-Dale 反应)的影响,以建立虾蛋白过敏实验动物模型。结果显示,用0.01～2g/100mL 卵白蛋白致敏并激发后,100% 豚鼠呈全身过敏反应阳性,0.1g/100mL 卵白蛋白组的豚鼠100% 死亡。相似质量浓度虾蛋白(0.01～1g/100mL)的全身过敏反应与卵白蛋白相近(与卵白蛋白组比较,P ＞ 0.05);Schultz-Dale 反应的实验结果与全身过敏反应结果相似。由此,初步建立虾蛋白过敏实验的动物模型。