The Effects Of Humic Substances On Pinus Callus Are Reversed By 2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid

The reversal of humic matter-induced inhibition of callus growth and metabolism by 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was studied in Pinus laricio. Two forest humic fractions (relative molecular mass (M_r) > 3500), derived from soil under Fagus sylvatica (Fs) and Abies alba (Aa) plantation, were used. Pinus laricio callus was grown for a subculture period (4 weeks) on Basal Murashige and Skoog (MS) medium plus forest humic matters (Fs or Aa), at a concentration of 1 mg C/l, and then was transferred, for an additional four weeks, to a MS medium culture without humic matter, but with different hormones: indole-3-acetic acid (IAA, 2 mg/1) or 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D, 0.5 mg/1) and/or 6-benzylaminopurine (BAP, 0.25 mg/1). Growth of calluse, glucose, fructose, and sucrose contents, and activities of soluble and bound invertases, glucokinase, phosphoglucose isomerase, aldolase, and pyruvate kinase were monitored. The results show a negative effect of humic fractions on callus growth, due to decreased utilization of glucose and fructose, and decreased activities of glycolytic enzymes. The effects are reversible. Substitution of humic fractions with 2,4-D+BAP or 2,4-D is followed by an increase of glycolytic enzyme activities and, consequently, by the utilization of glucose and fructose that induces a restart of growth. In contrast, the inhibitory effects of humic fractions persist when they are substituted with BAP alone, indicating that only the auxin 2,4-D is capable of reversing the negative effects. A possible competitive action on the auxin-binding site between 2,4-D and the chemical structures in the forest humic fractions is suggested.     

培养基成分和培养条件对黄芪愈伤组织中黄芪皂苷积累的影响

对提高黄芪愈伤组织中黄芪皂苷含量的人工调节技术进行了研究。生长在6,7-V基本培养基上的黄芪愈伤组织中黄芪皂苷含量比MS培养基上的高,而且光照比黑暗更有利于黄芪皂苷合成。调整6,7-V培养基中氨态氮和硝态碳的比例为1∶1(氮源总浓度为60 mmol.L-1)、KH2PO4浓度为1.5 mmol.L-1、CaCl2浓度为8.97 mmol.L-1时比较适合黄芪皂苷的积累。以蔗糖为碳源比葡萄糖和麦芽糖更有利于皂苷的积累。通过调节培养基成分和培养条件是改变黄芪细胞中黄芪皂苷积累趋势的一个重要手段。     

东北红豆杉组织培养的研究

以东北红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｕｓｐｉｄａｔａ）的不同外植体进行愈伤组织诱导、继代和再分化培养，结果发现在ＭＳ培养基上，幼叶的出愈率最高，达７８３％，在Ｂ５培养基上，幼基的出愈率最高，达７６０％。诱导愈伤组织最适２，４－Ｄ浓度为２－３ｍｇ·Ｌ－１。经抗氧化剂处理，愈伤组织在改良ＭＳ培养基上经多次继代培养，褐化现象减轻或消失，生长速率最高可达００９０ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１（鲜重）。在分化培养基上，由愈伤组织诱导出绿芽点。     

藏红花胚性愈伤组织的发生及其调控

为提高藏红花胚性愈伤组织的繁殖系数和出芽率,促进其生长和分化,以建立藏红花离体快繁体系,解决藏红花资源短缺问题,研究了藏红花胚性愈伤组织的发生及其调控. 结果表明,获得的藏红花球茎1细胞系具有良好的胚性愈伤组织发生能力. 胚性愈伤组织生长的优化条件为：在添加3.0 mg/L 6-BA, 0.25 mg/L NAA和400 mg/L CH的B5固体培养基上,22℃下全时暗培养25 d,繁殖系数达到9 g/g. 胚性愈伤组织出芽的优化条件为：在添加3.0 mg/L 6-BA, 0.25 mg/L NAA和400 mg/L CH的1/2 B5固体培养基上,在22℃及光照强度31.74 mmol/(m2×s)条件下,每天光照10 h,暗培养14 h,培养45 d出芽率达到44.7%,高于国外报道的20%.     

暗紫贝母愈伤组织和不定芽诱导研究

目的：对暗紫贝母愈伤组织和不定芽诱导进行研究。方法：以暗紫贝母新鲜鳞茎为外植体,在附加NAA和6-BA不同浓度配比的MS培养基上进行离体培养。结果：鲜鳞茎能诱导形成愈伤组织和不定芽。其中,NAA1.2mg/L＋6-BA1.8mg/L的MS培养基中外植体愈伤组织诱导率最高,达53.3%;NAA1.2mg/L＋6-BA1.6mg/L的MS培养基中外植体不定芽诱导率最高,达73.3%。结论：建立了暗紫贝母愈伤组织和不定芽诱导的培养方法。     

女贞子胚培养及愈伤组织诱导

采用不同培养基对女贞子的胚进行培养,并对其幼苗的叶片和嫩茎进行愈伤组织诱导.结果表明,在胚的萌发诱导中,以MS+1.00 mg·L-1 6-BA培养时,女贞子幼苗的叶长和根长最长;以MS+1.50 mg·L-1 6-BA培养时,女贞子幼苗的茎高最高;MS+1.50 mg·L-1 6-BA+0.30 mg·L-1 2,4...     

大豆愈伤组织的诱导与离体培养

本研究选用6个大豆品种，以大豆下胚轴和子叶为供试外植体，探讨了激素、基因型及外植体的差异对形成愈伤组织的影响，结果表明，诱导愈伤组织合适的培养条件是：MS＋2，4-D2．0mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖3%＋琼脂0．8％，所有的基因型均能形成愈伤组织，但不同基因型诱导愈伤组织能力有差异，以中黄十三最高；不同外植体诱导愈伤组织能力也不一样，下胚轴的诱导能力比子叶强。     

3个香型矮牵牛品种的组织培养再生体系

以3个香型矮牵牛品种的带叶茎尖为外植体,研究了不同BAI、BA及NAA配比对初代培养、继代培养和生根的影响。结果表明:供试的3个基因型诱导成苗和继代培养所需的培养基激素浓度差异较大,BA浓度变化在0.1～1mg.L-1之间;但对于同一基因型而言,高浓度的BA可以直接从茎和叶上诱导出愈伤组织,由愈伤组织形成不定芽苗;中浓度的BA使其形成定芽和不定芽两种苗;低浓度的BA基本为顶芽和侧芽两种定芽成苗。3个品种在1/2MS+0.25mg.L-1NAA+0.25mg.L-1IBA培养基上都能生根,且生根迅速,生根效果较好。     

DRM1,DRM2参与拟南芥愈伤组织的形成

通过体视显微镜、半薄切片、扫描电子显微镜观察拟南芥DNA从头甲基化酶DRM1,DRM2的双突变体drm1/drm2在愈伤诱导培养基上所诱导的愈伤组织,结果发现:与野生型相比,其种子和根、叶、叶柄等外植体,均具有在同等条件下愈伤组织增多,分裂旺盛的表型。编码拟南芥DNA从头甲基化酶DRM1,DRM2的基因DRM1,DRM2的表达水平也与生长素、细胞分裂素等外源激素浓度相关,由此推测外源激素浓度影响DRM1,DRM2的表达。暗示了DRM1,DRM2可能参与了拟南芥愈伤组织形成过程。