紫色红曲霉液态发酵产糖化酶的工艺研究

通过培养基和发酵条件的优化提高紫色红曲霉G6液态发酵产糖化酶活力。研究接种菌龄、碳源、氮源、金属离子、培养基初始pH、接种量、装液量、摇床转速以及温度等对产酶的影响。结果表明,最佳培养基配方（w/v）为大米粉8%,蛋白胨1%,KCl0.1%,ZnSO₄0.01%,FeSO₄0.005%,MnSO40.015%,培养基初始pH为4.0;最适发酵条件:装液量50mL/250mL,转速150r/min,温度32℃,接种量12%（v/v）;在此条件下发酵10d,糖化酶活力为1652.36U/mL比优化前（109.54U/mL）提高了14.08倍。      

高糖化力菌种的筛选及诱变育种

固体曲中精化酶能将淀粉水解为葡萄精,进而被微生物发酵生成酒精.以分离筛选出的1株产糖化酶的黑曲霉(酶活265.21U/g干曲)为出发菌,经紫外线及原生质体紫外线复合诱变育种,获得1株糖化酶活力较高、生产性能稳定的菌株,其酶活达到3367.79U/g干曲,比原始菌株提高1169.86%.     

高糖化力白曲霉的复合诱变及固态发酵条件优化

采用紫外线及常压室温等离子体（ARTP）复合诱变技术对白曲霉（Aspergillus candidus）Nz 3.602进行诱变选育。对诱变致死率进行测定,确定最佳诱变条件为：15 W紫外灯照射12 min,ARTP处理40 s。对突变菌株进行透明圈法初筛、糖化力测定法复筛,最终得到产酶能力较高的突变菌株B5。其糖化酶酶活为1 050.32 U/g,较出发菌株糖化酶酶活提高85.53%,并且遗传稳定性较好。以菌株B5为研究对象,经单因素试验和响应面分析法对其固态发酵条件进行优化,最佳固态发酵条件为：糠壳添加量15%,原料含水量70%,接种量12%,培养时间5 d,培养温度30 ℃。该条件下糖化酶酶活为（1 254.17±6.14） U/g,比优化前提高了19.41%。     

PVP/(NH4)2SO4液-固萃取法提取糖化酶的研究

以聚乙烯吡咯啉酮（PVP）／（NH4）2SO4液-固萃取体系研究了工业糖化酶的萃取分配行为。萃取的适宜条件为10％PVP（K30），1．36mol．L^-1（NH4）2SO4，pH4．6。糖化酶浓度直接影响固-液两相的分配行为。在此条件下，该体系可成功实现对糖化酶的提取。     

泸型大曲中根霉固态发酵产糖化酶条件研究

对泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行了研究。以糖化酶活力为评价指标,设计单因素实验,研究培养基水分含量、培养时间、培养温度对根霉产糖化酶的影响,在此基础上,利用Box—BenhnkenDesign的方法,对根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行优化,结果显示泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的优化条件为培养温度29℃,培养基水分含量53％,培养时间164h,糖化酶的酶活力为2194．44U／g。     

高吸油率玉米多孔淀粉的制备工艺研究

以玉米淀粉为原料,用酶水解法研究高吸油率玉米多孔淀粉的形成,在研究单因素的基础上,优化了制备玉米多孔淀粉的工艺条件.实验结果表明:在α-淀粉酶、糖化酶之比为1∶3,酶用量1.5%,pH5.0,温度55℃,时间18 h的条件下,得到了 吸油率较高的多孔淀粉.     

微波辐射下双酶催化淀粉水解的动力学研究

以玉米淀粉为反应底物,研究了α-淀粉酶和糖化酶分别在微波辐射和水浴加热条件下水解玉米淀粉的动力学特性。考察了pH、温度、底物质量浓度、酶用量对玉米淀粉水解反应速率的影响。结果表明,微波辐射条件下的平均反应速率比水浴加热提高了20%以上。以米氏方程为基础,研究了两种加热方式下的米氏常数Km、最大反应速率νm和抑制常数Ki。结果表明,微波辐射下α-淀粉酶的Km=3 922.76 g/L,νm=1.72×10-3mol/(mL.min),糖化酶的Km=173.31 g/L,νm=3.289×10-5mol/(mL.min);水浴加热条件下α-淀粉酶的Km=312.03g/L,νm=1.21×10-4mol/(mL.min),糖化酶的Km=16.14 g/L,νm=3.89×10-6mol/(mL.min);微波辐射下糖化酶的抑制常数(Ki)低于水浴加热的抑制常数。     

提高黑曲糖化酶活力的研究——菌种选育

使用DES、γ射线、5-FU、NTG等诱变处理黑曲霉A·S·3.4309,获得高产变异株7E-19-12,糖化酶活力比初始菌株提高100.6%,用30001发酵罐验证,其酶活力达9300 u/ml,并且2淀粉酶,酸性蛋白酶,转移葡萄糖甘酶含量较低。     

新型糖化酶在淀粉制葡萄糖中的应用

在玉米淀粉双酶法制糖工艺中使用OPTIMAX4060VHP强效液体糖化酶,使工艺操作简单方便,生产更加稳定;降低可逆反应,提高糖液的葡萄糖含量;节约蒸汽;提高糖液透光率和糖液质量,具有良好的经济效益。     

Cultivable bacterial diversity and amylase production in three typical Daqus of Chinese spirits

Both culture‐dependent method and molecular technique were firstly used to simultaneously investigate the cultivable bacterial diversity and amylase production in three typical Daqus of Chinese spirits. The results showed that both cultivable bacterial diversity and amylase production were obviously different. The species of nine bacteria from Deshan, nine from Baisha and six from Wuling Daqus were identified. The total bacterial strains of 17, 15 and 14, and 9, 16 and 10 could produce α‐amylase and glucoamylase, respectively, from the Daqus, and the enzyme yields were different. Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis and Bacillus amyloliquefaciens not only were dominant bacteria in the Daqus, but also possessed high activities of α‐amylase and glucoamylase. By comparison, Bacillus cereus and Bacillus oleronius were found to be another predominant bacterial species and good producers of α‐amylase and glucoamylase in Deshan and Wuling Daqus, respectively.