超高效液相色谱-同位素稀释质谱法测定配方奶粉中的泛酸

建立测定配方奶粉中泛酸的超高效液相色谱-同位素稀释质谱方法。样品经乙酸铵溶液提取、三氯甲烷除 蛋白后,进行超高效液相色谱-串联质谱分析,采用HSS T3液相色谱柱分离,以10 mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲 酸）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,多反应监测模式,内标法定量。结果表明：方法定量限为0.040 mg/100 g,线 性范围内低、中、高3 个标准添加水平的回收率为96.9%～104.3%,相对标准偏差为3.78%～5.04%。该方法操作过 程简单、分析周期短、灵敏度高、重复性好,适用于奶粉中泛酸的测定。     

同位素稀释-超高压液相色谱-串联质谱法测定 维生素营养液中的泛酸含量

目的 建立测定维生素营养液中泛酸含量的同位素稀释-超高压液相色谱串联质谱法(ID-UHPLC-MS/MS)。方法 样品经高氯酸水溶液涡旋提取和除杂、超纯水稀释后,以HSS T3色谱柱和0.1%(v/v)甲酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱分离,以串联质谱的多反应监测模式检测,内标法定量。结果 泛酸在5 ~1000 μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数(R₂)为0.9998;方法检出限为0.02 mg/100 g,定量限为0.07 mg/100 g;3个添加水平的回收率为92.5%~103%,相对标准偏差(n=6)为2.3%~5.2%;日间相对标准偏差(n=3)为2.72%。结论 本方法操作简便、分析速度快、灵敏度高、重复性好,为维生素营养液中泛酸含量的定性定量分析提供了可靠的依据。     

Pantothenic Acid and Biotin Retention in Cooked Legumes

Samples of legumes were analyzed raw for panfothenic acid and biotin. Pooled samples were prepared in one of three cooking times: 20, 90 or 150 min. For each cooking time legumes were presoaked with a short or long soak treatment. Average pantothenic acid retention in those cooked 20 min was 76% without pre-soak, 33% for short, and 44% for long soak. Biotin retention was 95% without pre-soak, 86% for short and 90% for long soak. In the 90 min group, retention differed between short soak and long soak for pantothenic acid (40% vs 58%), but not for biotin (98% vs 92%). No difference (P > 0.05) occurred in retention between short soak and long soak in the 150 min group for either nutrient. Biotin losses were minimal compared to pantothenic acid and methods of preparation could affect vitamin retention in legumes.     

Molecular cloning and application of a gene complementing pantothenic acid auxotrophy of sake yeast Kyokai no. 7

Kyokai no. 7 is the most widely used yeast in sake brewing. This yeast is a pantothenic acid auxotroph at 35 degrees C, and this phenotype has been used to distinguish Kyokai no. 7 from other sake yeasts. We cloned a DNA fragment complementing the pantothenic acid auxotrophy from a genomic library of a Saccharomyces cerevisiae laboratory strain. DNA sequence analysis revealed that the DNA fragment encodes ECM31, the deletion of which had previously been identified as a calcofluor white-sensitive mutation. The ECM31 product is similar to the Escherichia coli ketopantoate hydroxymethyltransferase. Disruption of ECM31 in a laboratory S. cerevisiae strain resulted in pantothenic acid auxotrophy, indicating that ECM31 is also involved in pantothenic acid synthesis in yeast. A hybrid of a Kyokai no. 7 haploid and the ecm31 disruptant required pantothenic acid at 35 degrees C for its growth, suggesting that Kyokai no. 7 possesses a temperature-sensitive allele of ECM31. Thus, the ECM31 gene can be used as a selective marker in the transformation of Kyokai no. 7.     

超高效液相色谱-同位素稀释质谱法测定食品中的泛酸

目的 建立一种快速准确测定食品中泛酸含量的方法。方法 样品中的泛酸用水提取,经乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液除杂后,以乙腈和0.1%甲酸溶液为流动相,通过Waters HSS T3 C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)梯度洗脱分离,流速0.3 mL/min,进样量2 μL,柱温35 ℃,用串联质谱检测,同位素内标法定量。结果 泛酸在10-600 μg/L浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.025 mg/100 g,定量限为0.075 mg/100 g,精密度的相对标准偏差为1.6%~1.8%,3个加标水平的回收率在92.6%~105%之间,相对标准偏差为1.9%~3.8%。该方法与微生物法相比结果无明显差异,且测定时间短,与高效液相色谱法相比抗干扰能力强。结论 超高效液相色谱-同位素稀释质谱法操作简单,快速准确,适用于多种食品中泛酸的测定。     

HPLC法测定乳制品中泛酸的含量

建立了高效液相色谱法测定乳制品中泛酸含量的方法。采用色谱柱为VYDAC C18，流动相甲醇：KH2PO4（0.02mol/L)为1：9，流速为0.8mL/min，检测波长为200nm，样液中泛酸与相邻组分间的分离度为1.94，理论塔板数为5673，用外标法测定。结果表明，标准曲线相关系数为0.9908；平均回收率为99.96%；SD为0.729，CV为1.21%。     

液相色谱-质谱联用法检测特殊医学配方食品中泛酸的含量

目的 建立一种快速准确高效的方法检测特殊医学配方食品中泛酸的含量。 方法 试样中的泛酸, 用酸碱沉淀杂质, 水超声提取, 经Agilent Eclipse XDB-phenyl柱分离, 以甲醇和0.1%甲酸溶液为流动相, 梯度洗脱, 流速为0.4 mL/min, 柱温40 ℃, 采用液相色谱-质谱法检测。结果 泛酸在0.4~7.6 ?g/mL的浓度范围内, 线性关系良好, 相关系数r均大于0.99。平均回收率在90.79%~106.93%之间, 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为6.3%, 且在6 h内含量保持稳定, 精密度的相对标准偏差(RSD)为1.5%。结论 液质联用法能准确快速高效检测特殊医学配方食品中的泛酸含量, 能对特殊医学用途配方食品中泛酸的含量起到质量控制的目的。     

同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱法检测蜂蜜中泛酸含量

建立了同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）检测蜂蜜中泛酸（维生素B5）的快速定量和确证方法。样品经0.1%氨水（V/V）提取,MAX固相萃取柱净化后,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,使用HSS T3色谱柱进行分离,电喷雾正离子多反应监测（MRM）模式检测,同位素内标法定量。在优化条件下,泛酸在0.500～500 μg/L范围内线性良好,相关系数（R2）为0.999 6;方法检出限为1.0 μg/kg（S/N=3）,定量限为3.0 μg/kg（S/N=10）;回收率在98.3%～98.7%之间,相对标准偏差（RSD）为2.4%～3.1%。通过市售蜂蜜样品测试表明,该方法操作简单、检测结果准确,可用于蜂蜜中泛酸的快速检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定配方奶粉中泛酸、生物素和氰钴胺素

建立了超高效液相色谱-串联质谱联用技术同时测定配方奶粉中泛酸、生物素和氰钴胺素的方法。样品经水溶超声提取、三氯甲烷除蛋白后,进行超高效液相色谱-串联质谱分析,采用HSS T3液相色谱柱分离,以10mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾-正离子电离源多反应监测模式进行定性和定量分析。结果表明:泛酸(VB5)的方法定量限为5μg/100g,生物素(VB7)为2μg/100g,氰钴胺素(VB12)为0.2μg/100g;回收率为79.4%~87.8%,相对标准偏差为3.3%~5.3%。泛酸的线性范围0.5~1000ng/m L,生物素为0.2~10ng/m L,氰钴胺素为0.02~10ng/m L。该方法分析操作简单、速度快、灵敏度高、重复性好,适用于配方奶粉中泛酸、生物素和氰钴胺素的同时测定。