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1.
对卵黄高磷蛋白(PV)及其磷酸肽(PPPs)的热稳定性、乳化活性和乳化稳定性以及高压脉冲电场对卵黄高磷蛋白二级结构的影响进行了实验考察,并研究了PV和PPPs的抗氧化活性,分别测定了PV和PPPs清除DPPH自由基的能力、还原力及与金属铁离子的螯合能力。结果表明,PV和PPPs具有较好的热稳定性、乳化性及稳定性,且PV要优于PPPs;经高压脉冲电场处理后的PV样品,其二级结构变化不大,说明高压脉冲电场不会改变PV的二级结构;此外,PV和PPPs具有较好的清除DPPH自由基、还原能力以及金属离子螯合的能力,说明PV和PPPs具有抗氧化能力,且PPPs要优于PV。 相似文献
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研究了卵黄高磷蛋白磷酸肽(Phosvitin Phosphopeptide,PPP)及其钙螯合物(PPP-Ca)在成骨细胞(MC3T3-E1)和破骨前体细胞(RAW264.7)共培养体系中对成骨细胞分化的调节作用。对细胞毒性、碱性磷酸酶(AKP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性和TRAP染色进行分析;用RT-PCR技术进一步探究成骨细胞RANKL/OPG通路相关蛋白的mRNA表达情况。结果发现,PPP和PPP-Ca可以使MC3T3-E1体系中的AKP活性分别增加9.5%和12.7%;PPP和PPP-Ca的加入可以使MC3T3-E1体系中OPG基因mRNA的表达量从0.92分别提升至1.25和1.39、使RANKL基因mRNA的表达量从1.00分别提升至1.23和1.45。该研究结果表明,PPP和PPP-Ca可有效促进成骨细胞的分化。实验结果为进一步探索磷酸肽在多细胞模型体系中的作用提供了研究基础,同时为磷酸肽的功能活性开发提供理论依据。 相似文献
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本研究探讨了在模拟小肠末端环境下酪蛋白磷酸肽(β-casein phosphopeptides(1-25),简称CPP)与不同钙盐的相互作用情况。实验以等温滴定量热仪为方法,以热力学参数、化学计量数及亲和力常数为指标,评价不同钙盐与CPP的相互作用情况。结果表明,CPP与不同钙盐两两相互作用,且均为由熵驱动的自发反应(pH 8.0,37 ℃),该反应的主要推动力为离子相互作用力。不同钙盐与CPP反应时,焓变,熵变及自由能无明显差别(p>0.05),而化学计量数和亲和力常数存在显著性差异(p<0.05)。CPP与葡萄糖酸钙,乳酸钙和氯化钙相互作用时,化学计量数较高(3~4 mol/mol),而与天冬氨酸钙结合的化学计量数较低(2~3 mol/mol)。此外,相比其他钙盐,乳酸钙与CPP结合的亲和力常数最低。多肽与钙盐结合数高且亲和力较低时有利于小肠对钙的吸收。因此,相对于其他钙盐,CPP与乳酸钙结合可能更有利于小肠对钙的吸收。本研究为更好地了解CPP与不同钙盐溶液在模拟小肠末端环境下的热力学变化及结合情况奠定坚实的基础。 相似文献
7.
高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量 总被引:2,自引:0,他引:2
建立一种同位素稀释-高效液相色谱-串联质谱法定量检测婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPPs)含量的方法。经Q Exactive Orbitrap扫描,Uniprot蛋白质数据库初步确定CPPs所含肽段,根据质谱响应以及加标回收率等方法学验证实验进一步筛选确定CPPs的特征肽段。样品经过前处理后,采用ACQUITY UPLC BEH 300 C18色谱柱分离,多反应离子监测模式定量测定其中的CPPs特征肽。根据CPPs原料与CPPs特征肽含量的折算系数,从而确定出样品中CPPs的含量。方法学验证结果表明,所建立的方法在10~150?mg/100?g范围内线性关系良好,相关系数大于0.999。在高、中、低3?水平加标实验中,回收率在96.2%~100.2%之间,日间重复性在5.3%~7.8%之间。方法定量限为1?mg/100?g,可以满足婴幼儿配方奶粉中不同CPPs含量水平的定量要求。 相似文献
8.
本文利用反相高效制备液相色谱对酪蛋白磷酸肽(CPPs)进行初步分离,根据色谱图峰形收集得到4个组分,用分析型反相高效液相色谱进一步分离纯化组分F2,得到亚组分P3,低温减压浓缩回收溶剂,冷冻干燥得到CPPs单体P3粉末。通过已知CPPs单体P3的氨基酸序列人工固相化学合成CPPs单体P3,经质谱和高效液相色谱鉴定,合成CPPs单体P3的分子量与天然单体分子量一致且纯度为98.13%。天然与合成CPPs单体P3的液相保留时间一致,相同浓度条件下合成单体的紫外吸收显著高于天然单体,可能与空间结构差异有关。经红外光谱和圆二色光谱分析,天然与合成CPPs单体P3均含有α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规卷曲特征结构,主要以β-折叠-反平行式和无规卷曲形式存在,但不同二级结构形式比例存在差异。天然与合成CPPs单体P3的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲比例存在显著差异。天然与合成CPPs单体P3浓度从2 mg/m L上升到4 mg/m L时,天然单体P3不同形式二级结构变化较小,主要由α-螺旋和无规则卷曲向β-折叠-反平行式转变,合成单体P3不同形式二级结构变化显著,主要由α-螺旋和β-转角向β-折叠-反平行式和无规则卷曲转变。 相似文献
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