Effect of alkali halides on α-chymotrypsin activity in the plastein reaction

The influence of different alkali halides (LiF, LiCl. LiBr, NaF, NaCl, NaBr, KF, KCl and KBr) on α-chymotrypsin-catalysed plastein synthesis has been studied in aqueous medium at different substrate concentrations. The results showed an enhancing effect on the plastein synthesis enzyme action by the presence of salts, proportional to salt concentration, which was decreased when the substrate concentration was increased. Additionally, these facts allowed the ions to be classified as a function of their activation power (F^? > Cl^? > Br^?: K⁺ > Na⁺ > Li⁺), which was in agreement with the interpretation of the Hofmeister lyotropic series. The influence of the several phenomena produced by the presence of salts in the plastein reaction, such as, salt-substrate interactions and water activity, as well as the presence of deactivated enzyme was also analysed. The obtained results showed that the substrate concentration is the most important factor, and the activating effect of salts could be simultaneously involved with both a structural change on the substrate conformation and a reduction of water activity into the reaction media, enhancing the catalytic capability of the α-chymotrypsin towards a peptide synthesis action.     

合成类蛋白反应与食物蛋白品质改良

合成类蛋白反应在控制食物蛋白营养性和功能性方面显示出巨大的潜力,已成为食品工业的研究热点。综述了其目前存在的各种不同反应机制、反应的影响因素以及其在食物蛋白加工领域的应用研究。     

酪蛋白类蛋白物的溶剂分级和酶水解对ACE抑制活性的影响

利用响应面法优化类蛋白反应条件修饰酪蛋白水解物制备酪蛋白类蛋白物.酪蛋白类蛋白物的ACE抑制活性高于酪蛋白水解物,IC50值从52.6 mg/L降低到14.9 mg/L.利用乙醇-水混合溶剂对酪蛋白水解物和类蛋白物进行分级,结果表明,极性最低的溶剂得到的上清液部分活性较高,而沉淀部分活性较低.4种蛋白酶水解酪蛋白类蛋白物的分级产物,导致活性下降,除碱性蛋白酶外,木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的水解产物ACE抑制活性为31.5％～46.8％,但是仍然高于酪蛋白水解物的ACE抑制活性(27.8％),表明类蛋白反应提高了酪蛋白水解物对一些蛋白酶的体外抵抗能力.     

Valorisation of protein hydrolysates from animal by-products: perspectives on bitter taste and debittering methods: a review

Conversion of animal by-products to high value-added food ingredients is one of the top trends in the slaughter industry. Enzymatic hydrolysis of animal by-products can generate protein hydrolysates, which provides an opportunity for effective utilisation. However, bitterness of protein hydrolysate is a major undesirable aspect for various applications. In this review, the current knowledge on protein hydrolysates from animal by-products is briefly reviewed. The structural features of bitter peptides and bitter taste receptors are summarised. Moreover, the potential approaches for debittering protein hydrolysates are highlighted, including exopeptidase treatment, Maillard reaction, plastein reaction and encapsulation. In addition, the current debittering strategies and challenges are also discussed. This article presents some opportunities to utilise protein hydrolysates from animal by-products and their debittering methods.     

类蛋白反应修饰的牡蛎肽锌结合物的生物利用性

通过类蛋白反应(Plastein)修饰制备具有较高锌离子结合能力的牡蛎源肽(EVPPEEH),其锌结合能力为161 mg/g。以缺锌型SD大鼠为试验模型,以牡蛎酶解肽-锌结合物OPZ、类蛋白反应修饰的牡蛎酶解肽-锌结合物LPZ和ZnSO4(ZS)为对照,研究牡蛎源肽(EVPPEEH)与锌的结合物(MZ)在体内的生物利用率和生物利用途径。结果表明:MZ组大鼠血清锌水平,股骨锌储备量及肝脏锌含量和肾脏锌含量均显著高于各对照组。脾脏锌含量MZ组和LPZ组恢复程度相似,均显著高于OPZ组和ZS组。MZ组和各对照组大鼠体重和摄食量均显著增加,效果相似。大鼠小肠转锌蛋白(ZnT1)的表达量MZ组与无机锌组差异不是很明显,而小肽转运蛋白(PepT1)的表达量MZ组最高,相对于ZS组上调了20%,显著高于各对照组,说明大鼠小肠对MZ的吸收利用一部分是通过传统锌离子途径,另一部分是通过小肽途径。MZ有望成为一种新型高效的补锌制剂。     

耦合Plastein反应的大豆蛋白降压肽酶法制备技术

利用碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白,制备出水解度为16.6% 的大豆蛋白水解物,随后对水解物进行Plastein反应修饰。利用响应面分析优化修饰反应条件,得到适宜参数：底物质量分数45%、酶添加量275U/g 蛋白质、反应时间3～4h、温度30℃。制备修饰反应程度不同的9 种修饰产物并评价其体外ACE 抑制活性,发现修饰产物的IC50 值为0.64～1.30mg/mL,均小于大豆蛋白水解物IC50 值(1.45mg/mL)。排阻色谱分析结果确认,修饰产物中有更多的高分子质量肽段存在。结果显示,大豆蛋白的酶解以及耦合Plastein 反应修饰,是一种制备高ACE抑制活性大豆蛋白降压肽的新技术。     

罗非鱼下脚料蛋白合成类蛋白反应的工艺优化

以罗非鱼下脚料为原料,采用Alcalase蛋白酶对其进行控制酶解,制备不同水解度的罗非鱼下脚料酶解蛋白,在此基础上添加胃蛋白酶对其进行合成类蛋白反应的研究。以类蛋白产率为指标,在反应温度恒定(37℃)的条件下,通过单因素实验,确定底物水解度为40%、反应时间24h,选取底物浓度、加酶量和pH值3个因素进行响应面实验,通过响应面分析法优化合成类蛋白反应的最佳工艺组合为:底物浓度44.16%,加酶量4.12%,pH值5.08;在此条件下,类蛋白产率达到(10.08±0.03)%,与响应面二次模型预测值(10.11%)无显著差异。     

类蛋白反应在蛋白水解物风味改善中的研究进展

蛋白质在酶解过程中,大量疏水性氨基酸残基暴露出来,产生浓重的苦味影响到蛋白质的风味.在酶的作用下,疏水性氨基酸残基经过类蛋白反应后数量降低,达到风味改善的效果.类蛋白反应与物化法改善蛋白水解液相比,具有无添加、无毒副作用等优点,应用前景广阔.     

合成类蛋白的研究进展

类蛋白反应不仅能有效去除蛋白水解物的苦味,而且能改善蛋白质的营养成分,并且在改善蛋白质的功能特性方面也起到一定效果。本文综述了合成类蛋白反应的反应机制、影响因素以及应用前景。     

类蛋白反应在食品中的应用

类蛋白反应通常认为是酶水解的逆反应。通过此反应可合成高分子量的类似蛋白质的物质，从而可以提高蛋白质的生物效价、改善蛋白质水解物的风味和蛋白质的功能性质，并能以该反应来提供新的蛋白质资源。许多研究人员已经将该反应应用于大豆蛋白，牛乳蛋白，鱼类蛋白等食品蛋白中，取得了蓖好的效果。由于类蛋白反应的反应机制仍然不清楚，其研究和应用受到了限制。但随着酶技术和微生物技术的快速发展，类蛋白必将在食品工业领域中得到更广泛和深入的应用。