持续性小剂量率γ射线照射妊娠中期母鼠对子鼠造血组织的影响

造血组织是辐射高敏感组织，胚胎动物的造血组织对辐射更为敏感。本文观察了持续性小剂量率γ射线照射妊娠中期母鼠，对出生子鼠股骨骨髓有核细胞数（ＢＭＣ）、造血干细胞（ＣＦＵ＿Ｓ）数及其在股骨骨髓腔中分布状况的改变，和对造血组织基质（ＣＦＵ－Ｆ）的变化。本实验观察到正常小鼠股骨骨髓ＣＦＵ－Ｓ分布，接近骨髓骨皮质的ＣＦＵ－Ｓ浓度最高，约为４１／１０＾５ＢＭＣ，近骨髓中心静脉窦ＣＦＵ－Ｓ浓度最低，大约是２２／     

Akzo Nobel积极开发新生物技术

日本经济产业省(METI)制定采用人的胚胎细胞(ES)创制实验用细胞的5年计划。该计划从2005财年开始执行，目标是要在日本建立将基因处理和转移为ES细胞的技术，并将ES细胞诱导／分化为有用的细胞。     

油酸对C57/BL6J小鼠脂肪干细胞体外成脂分化的影响

对C57/BL6J小鼠脂肪干细胞进行原代培养,通过流式细胞术鉴定细胞表面抗原标志物。体外培养条件下,在成脂诱导分化培养基中加入不同浓度的油酸处理小鼠ADSCs 3d,倒置显微镜下观察ADSCs的形态变化,油红O染色观察胞质中脂滴的聚集,并测定细胞中甘油三酯总量。结果表明,诱导3d后,油酸处理组细胞胞体显著增大,形态由梭形变为圆形,胞质内脂滴显著增多;油红O染色细胞中可见大量红色的脂滴染色。各浓度油酸处理组细胞胞浆内甘油三酯总量增多,显著高于对照组,并呈剂量效应关系。说明油酸可促进小鼠ADSCs体外成脂分化。     

Evaluation of apatite-coated chitosan microspheres for bone regeneration

The apatite-coated chitosan microspheres were fabricated by incubating chitosan in five times simulated body fluid. The apatite deposited on the microspheres was similar to natural bone mineral, as demonstrated by scanning electron microscopy, X-ray diffraction spectra and Fourier transformed-infrared spectroscopy analyses. Rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells （BMSCs） were seeded on apatite- coated microspheres to investigate the effect of this scaffold on cell proliferation and differentiation. BMSCs seeded on uncoated microspheres were served as a control. In vivo experiment was evaluated by transplanting the microspheres loaded with or without BMSCs in 5-mm cranial defects of Wistar rats. Bone regeneration was investigated via micro-CT and histological analysis. It was found that apatite-coated chitosan microspheres could significantly promote the proliferation and alkaline phosphatase activity of BMSCs compared with uncoated microspheres. Histological slices and Micro-CT images at 8 weeks revealed much better regeneration of bone in the apatite-coated microspheres loaded with BMSCs than the control. In addition, the defect filled with pure microspheres induced little new bone formation. Our findings suggest that the apatite-coated chitosan microspheres scaffold is a promising carrier of stem cells for cranial bone tissue engineering.     

Zii播种科技的种子

由10亿美元投资开发而成、具有革命意义的ZiiPlaszma干细胞计算平台是创新为开发者打造的强大、完整的生态系统解决方案。     

bFGF促增殖后骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元样细胞的分化

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)体外作用于骨髓间充质干细胞(Mesen-chymal stem cells,MSCs)后,诱导其向神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞定向分化的情况。方法从鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,用MTT法检测bFGF对骨髓MSCs生长的影响。10 ng/ml bFGF作用2 d后,通过IBMX、细胞因子bFGF、GDNFI、L-1β、中脑神经胶质细胞条件培养基和中脑神经细胞膜碎片等分组联合诱导骨髓MSCs向神经元样细胞、多巴胺能神经元样细胞分化,免疫细胞化学方法鉴定特异标志NSE、MAP-2a,b和TH的表达。结果在一定范围内,bFGF对骨髓MSCs具有明显的促增殖作用。分化的神经元样细胞表达NSE、MAP-2a,b和TH,联合应用GDNFI、L-1β、中脑条件培养基和中脑神经细胞膜碎片诱导7 d后,NSE阳性率为(27.774±2.747)%,MAP-2a,b为(28.006±3.080)%,TH为(3.098±0.352)%。结论体外骨髓MSCs被诱导分化成神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞,为帕金森等中枢神经系统疾病的细胞移植治疗奠定了基础。     

自体骨髓干细胞移植研究进展

细胞移植作为一种新的治疗方法备受医学界关注，但细胞供应短缺和免疫排斥是阻碍这一疗法临床推广的主要难题。自体骨髓干细胞移植在一定程度上可缓解此矛盾。文章综述了自体骨髓干细胞移植治疗脑、肝、心等重要器官疾病的基础和临床研究现状，以及骨髓动员剂在骨髓干细胞移植中的作用。     

腺病毒载体携带HSV1-TK报告基因感染BMSCs后摄取~(131)I-FIAU的实验研究

用内部核糖体进入序列(IRES)将报告基因单纯疱疹I型病毒胸苷激酶(HSV1-TK)和治疗基因脑源性神经营养因子(BDNF)连接,双启动子法将TK-IRES-BDNF与增强绿色荧光蛋白(EGFP)包装到重组腺病毒载体中,得到Ad5-TK-IRES-BDNF-EGFP,扩增、纯化、测定病毒滴度;以感染复数(MOI)为0、50、100、150、200、250感染体外培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs),以重组腺病毒Ad5-EGFP为无效对照病毒。荧光显微镜下观察感染细胞的绿色荧光细胞阳性率。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测感染细胞增殖能力。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)诱导感染细胞向神经元细胞分化,显微镜下观察细胞形态变化。实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)和2-△△CT法分析两目的基因的相对表达量(CT)。观察感染细胞对131I-FIAU的摄取情况。重组腺病毒Ad5-TK-IRES-BDNF-EGFP在MOI为150可高效感染BMSCs,感染细胞存活率98%,且保持良好的神经元细胞诱导分化能力。RQ-PCR检测两目的基因随着腺病毒MOI增加表达增强,且TK和BNDF两基因的表达有良好的线性相关(r=0.973,P0.05,n=3)。在前3h可见感染目的基因组细胞对131I-FIAU的摄取程度与时间呈正相关,3h感染目的基因组对131I-FIAU摄取率可达(31.42±0.46)%(n=3),随后增加不明显。各点感染目的基因组摄取率均显著高于对照组(t=23.06–173.83,P0.05,n=3)。重组腺病毒载体能高效、低毒感染BMSCs,IRES介导两目的基因表达有良好的线性相关。本研究表明感染目的基因细胞可有效介导HSV1-TK摄取131I-FIAU,为后续放射性核素报告基因活体显像示踪转基因BMSCs治疗脑梗死提供了细胞水平依据。     

花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建

旨在通过花鲈胚胎干细胞(LJES1)移植构建嵌合体,证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性.采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内,细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率为5%～10%,以此为供体,通过显微注射方法把20～50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中,共移植囊胚478枚,获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎,其中的15枚胚胎发育成鱼苗.荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合,嵌合部位可分布于胚体的三个胚层;同时也证明GFP是一种优良的遗传标记.本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据.     

Toll样受体预活化的人脂肪间充质干细胞对人肺癌H460细胞生长的抑制作用

目的 观察聚肌胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,简称为Poly(I∶C)]和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预活化后的人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,bADMSCs)对人肺癌H460细胞生长的抑制作用.方法...