大豆异黄酮抗大鼠T细胞衰老及抗氧化作用研究

为研究大豆异黄酮抗大鼠T细胞衰老和抗氧化作用，选用老龄SD大鼠，观察大豆异黄酮对T细胞CD28表达水平及肝脏氧化应激水平的影响。实验设立青年对照组、老龄对照组和大豆异黄酮0．33、0．99g／kgBW剂量组，其中剂量组按剂量灌胃给予大豆异黄酮，对照组灌胃给予等量纯净水。4周后，分别制备肝细胞匀浆和肝单细胞悬液，用硫代巴比妥酸（TBA）比色法测定肝匀浆中丙二醛（MDA）含量，分光光度法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力，用流式细胞仪结合双氢罗丹明123（Rh123）和双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄（82DCFDA）染色法分别检测肝细胞线粒体膜电位（MMP）及活性氧（ROS）水平；另取外周血测定T淋巴细胞表面CD8／CD28表达情况。结果显示：青年对照组及大豆异黄酮剂量组的肝组织MDA含量均较老年对照组低，而SOD活力及肝细胞MMP水平均较老年对照组高（P〈0．05）；大豆异黄酮剂量组肝细胞内的ROS水平较老年对照组低（P〈0．01）。老年对照组大鼠外周血CD28^＋和CD28^＋／CD8^＋T细胞比例低于青年对照组，而CD28^-／CD8^＋T细胞比例高于青年对照组，给予大豆异黄酮样品组三者比例均介于两对照组之间。提示衰老大鼠外周血T细胞CD28表达降低，肝细胞线粒体膜稳定性下降，氧自由基清除能力下降，过氧化脂质分解的终产物增多；大豆异黄酮可提高老龄大鼠T细胞CD28表达水平，增加肝细胞抗氧化酶活性，稳定线粒体膜电位，减少活性氧产生。     

CD20在成年人急性B淋巴细胞白血病中的表达及其临床意义

目的 检测CD20在成年人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的表达,探讨其与临床特点的相关性.方法 回顾性总结分析96例成年B-ALL患者CD20表达情况,结合其临床特性和治疗转归进行分析.结果 96例成年B-ALL患者中,CD20阳性29例(30.20%),CD20阴性67例(69.79%).CD20阳性组与阴性组男女比分别为1.42∶1和1.79∶1(x2=0.27,P＞0.05),中位年龄分别为28岁与23岁,肝脾及淋巴结浸润比例分别为44.83%和41.38%、40.30%和35.82%,髓系抗原表达比例分别为51.72%与56.72%,Ph染色体和bcr-abl融合基因阳性比例分别为24.14%与28.36%,4周内完全缓解率分别为73.08%与68.85%,差异均无统计学意义(P值均＞0.05).在复发率和3年总体生存率上,CD20阳性组分别为54.55%与14.80%,CD20阴性组分别为29.63%与37.30%,两组间差异有统计学意义(x2=0.42,x2=5.31;P值均＜0.05).结论 CD20在成年人B-ALL表达与临床特点无相关性,但对判断患者的预后有一定的指导意义.     

成年人伴CD2表达B系急性淋巴细胞白血病免疫表型特征分析

目的 了解成年人伴CD2表达B系急性淋巴细胞白血病(CD+2 B-ALL)的免疫表型特征,为临床诊断、治疗及预后判断提供依据.方法 应用流式细胞术及多种单克降抗体检测18例成年人CD+2B-ALL及68例CD-2 B-ALL患者的免疫表型,并对其结果进行分析比较.结果 CD+2 B-ALL的发病年龄明显小于CD-2 B-ALL,18例成年人CD+2 B-ALL的大部分表面标志物与CD-2 B-ALL相似,其中CD10表达水平[(73.78±26.67)%]高于CD-2 B-ALL[(52.84±35.25)%],差异有统计学意义(t=2.35,P<0.05),CD33表达水平[(15.46±27.41)%]则低于CD-2 B-ALL[(31.15±27.72)%],差异有统计学意义(t=2.16,P<0.05);所有B-ALL患者都高表达CD34,阳性表达率分别为72.2%(13/18)和80.9%(55/68),差异无统计学意义(χ2=0.64,P>0.05).CD+2 B-ALL的CD20阳性率明显低于CD-2 B-ALL,差异有统计学意义(χ2=11.38,P<0.05).CD+2 B-ALL伴髓系抗原(CD13或CD33)表达率为44.4%(8/18),明显低于CD-2 B-ALL的72.1%(49/68),差异有统计学意义(χ2=4.86,P<0.05).结论 成年人CD+2 B-ALL与CD-2 B-ALL具有相似的免疫表型,主要来源于造血干细胞的恶性转化,CD+2 B-ALL伴髓系抗原(CD13、CD33)及CD20表达明显低于CD2 B-ALL,提示成年人CD+2 B-ALL可能有较好的预后.     

Rapid colorimetric detection of proteins and bacteria using silver reduction/precipitation catalyzed by gold nanoparticles

A colorimetric immunoassay has been developed based on the reduction and precipitation of silver ions catalyzed by colloidal gold. This method was evaluated for a noncompetitive heterogeneous immunoassay to detect ovalbumin as a model protein and Escherichia coli as model bacterium. The influence of relevant experimental variables, including the reaction time of antigen with antibody, the dilution ratio of the colloidal gold-labeled protein, time allowed for silver reduction/precipitation reaction and other parameters were examined and optimized. This colorimetric method of detection is convenient, easy to use and economic. The presence of the target molecules or antigens can be visually inferred based on the color change that occurs in a short time without using major instrumentation. This method is widely amenable for detection of proteins, viruses and bacteria.     

牡蛎诺如病毒受体合成基因类FUT10的克隆与组织表达

目的 克隆太平洋牡蛎类FUT10基因的cDNA序列,探究类FUT10 mRNA在牡蛎各组织中的表达差异.方法 基于同源比对方法,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆完整的类FUT10基因,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qua...     

辐照对虾过敏原抗原性的影响

目的探索辐照对海产品脱敏的效果,研究辐照对虾过敏原抗原性的影响。方法利用SDS-PAGE纯化的虾过敏原(原肌球蛋白)制备高效价、高特异性多克隆抗体,通过酶联免疫实验研究以3、5、7、10 kGy的辐照剂量处理对虾过敏原与患者特异性血清抗体IgE及多抗的免疫亲和力的影响。结果原肌球蛋白经辐照处理后,与患者特异性血清抗体IgE及鼠源多抗IgG的免疫亲和力下降。结论辐照可降低原肌球蛋白的致敏性。     

抗独特型抗体的研究进展

抗独特型抗体是针对抗体可变区的抗原决定簇（独特型）产生的特异性抗体，其中Ab2β是初始抗原在体内的“内影像”（intemal image），由于可模拟初始抗原而广泛应用于疫苗研究、肿瘤免疫、移植耐受、自身免疫病、食品安全等方面。对近年来抗独特型抗体的研究进展进行综述。     

Seldi-Tof-MS技术检测大鼠抗Thy-1模型的血清差异多肽

目的利用生物大分子表面加强的激光解析/电离时间飞行质谱技术(Seldi-Tof-MS)检测大鼠抗Thy-1模型在系膜增殖期血清中的差异多肽,寻找与系膜增殖相关的生物标志物。方法12只200g雄性Wistar大鼠,分为对照组和模型组,对照组尾静脉注射0.9%氯化钠注射液,模型组尾静脉注射抗Thy-1抗体,7d后处死。过碘酸-希夫(PAS)染色检测病理变化,Seldi-Tof-MS检测血清中差异多肽。结果模型组在第7天出现明显的系膜细胞增殖和基质积聚,与对照组相比,模型组有两个多态峰发生变化(P<0.01),其中质荷比为2746ku的多肽在模型组高表达,7399ku在模型组低表达。结论利用Seldi-Tof-MS在抗Thy-1模型血清中成功发现了两个差异多肽,他们可能是系膜增殖相关生物标志物。     

多发性骨髓瘤患者基质细胞衍生因子-1α、CD44v6表达的研究

目的 探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、CD44v6(一种变异的CD44受体)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达水平及其与病情进展的关系.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测24例MM患者[14例初发和复发MM患者(初发和复发MM组),10例病情稳定MM患者(病情稳定MM组)]和15位健康骨髓移植供者或非肿瘤良性贫血患者(对照组)的骨髓单个核细胞(MNC)和骨髓基质细胞(BMSC)培养上清的SDF-1 α、CD44v6水平.结果 初发和复发MM组MNC培养上清的SDF-1α、CD44v6表达水平[(7232.41±2644.97)pg/ml和(34.34±13.20)ng/ml]显著高于病情稳定MM组[(2315.49±748.29)pg/ml和(15.69±5.28)ng/m1](t=6.25、t=7.82;均P＜0.05)和对照组[(1149.52±636.06)pg/ml和(4.85±3.62)ng/ml](t=4.60、t=7.61;均P＜0.05).病情稳定MM组SDF-1α、CD44v6水平显著高于对照绀(t=2.99、t=4.87;均P＜0.05).9例初发和复发MM组的BMSC与人类骨髓瘤细胞系细胞U266加入rhIL-6进行混合培养后,SDF-1 α水平[(6180.25±5925.38)pg/ml]显著高于5例对照组BMSC[(1021.13±358.65)pg/ml]和9例初发和复发MM组[(1004.07±727.36)pg/ml](t=2.66、t=2.42;均P＜0.05).而其他BMSC各组问的SDF-1α水平差异无统计学意义(P＞0.05).SDF-1 α与CD44v6两者表达水平呈正相关(r=0.51,P=0.03).结论 SDF-1 α、CD44v6水平升高与MM的病情进展或发病有关,也可能与MM的肿瘤浸润过程有关;而这些体内过程可能需骨髓瘤细胞和BMSC与IL-6、SDF-1α和CD44v6等因素协同完成.     

免疫分析法检测无色孔雀石绿研究 Ⅰ人工抗原的合成

目的用免疫分析法检测水产品中无色孔雀石绿残留,研究无色孔雀石绿人工抗原的制备及其鉴定。方法用混酸法对无色孔雀石绿进行衍生化,连接上氨基基团,再经重氮化法与载体蛋白相结合,制备人工抗原。结果对无色孔雀石绿中间合成产物的液质联用分析结果表明,氨基产物中,无色孔雀石绿占51.83%,单氨基加成的无色孔雀石绿产物占40.48%,二氨基加成的无色孔雀石绿产物占7.69%。采用紫外法和Bradford法测定,人工抗原中无色孔雀石绿与载体蛋白的结合比为18∶1~23∶1。结论合成的人工抗原属于高质量的人工抗原。