生长抑素及其类似物的标记技术的发展

生长抑素受体显像剂是临床上应用最为普遍的放射性多肽类受体显像剂。用多种放射性同位素^111In、^90Y、^6Ga、^68Ga、^64Cu或是用^99Tc^m、^188Re以及卤族同位素^123I、^18F等对奥曲肽及其类似物进行标记得到的放射性多肽药物，已广泛用于临床显像。介绍了生长抑素类似物及标记技术的发展，对目前临床上比较成熟的生长抑素类显像剂做了综述和比较。同时介绍了目前在SST类似物开发领域及生物行为研究领域中的最新发展动态。     

大白鼠糖尿病模型建立及其胰腺α、β、D细胞功能测定

应用四氧嘧啶法建立了大白鼠糖尿病模型,并分别测定了门静脉和腔静脉中的血糖、胰高血糖素、胰岛素和生长抑素浓度。证实了糖尿病时,血糖、胰高血糖素、生长抑素浓度增高,胰岛素浓度降低。探讨了糖尿病时,生长抑素浓度改变对糖尿病的影响。结果表明,糖尿病时,生长仰素分泌的增加,可抑制胰高血糖素的增高,从而减轻血糖的升高。     

Preparation and 99mTc labeling of hydrazino nicotinamide modified RC-160 conjugate

1 INTRODUCTIONRadiopharmaceuticals based on small peptide have been currently received considerable illterests for the development of target specific imaging and therapeutic agents.lllln-DTPA-D-Phel-octreotide (Octreoscan), a synthetic peptide analogue of the somatostatin (SST), has fou-nd a widely clinical application for adaging a range of tumorsto date. RC-160 (Vapreotide) is another synthetic analogue of the native SST, which hasaffinity for a different set of SST sub-receptors …     

生长抑素基因在大肠杆菌pThioHis表达系统中的克隆与表达

目的　在大肠杆菌表达系统中高效表达生长抑素 (SS)基因。方法　以天然SS的氨基酸和基因序列为标准 ,将大肠杆菌使用频率较低的密码子分别更换成了使用频率较高的密码子 ,在SS基因的两端加上了合适的酶切位点 ,头部 :KpnI和NcoI;尾部 :PstI(这一酶切位点可与NsiI的切口互补 )。克隆至pThioHisA质粒的KpnI/PstI酶切位点后 ,再克隆至pThioHisA质粒的KpnI/NsiI酶切位点 ,使SS基因分别位于多克隆位点的尾部和前部。结果　重组质粒经酶切鉴定和基因序列测定证明 ,基因完全正确 ,在大肠杆菌TOP10中均得到较好的表达 ,IPTG诱导后 4h表达量基本达到最高 (37℃ ) ;在A60 0 0 .4～ 1.5之间用IPTG诱导均可获得到较好的表达 ,但以 0 .6左右为最佳诱导时机 ;在LB、TB和 2YT培养基中表达量依次为 :TB >LB >2YT ;表达的SS融合蛋白基本为水溶性的 ,具有良好的SS抗原性和免疫原性。结论　为基因工程SS大肠杆菌疫苗的研制奠定了基础     

~(111)In-DTPA-D-Phe~1-octreotide的动物实验

Somatostatin受体阳性肿瘤显像剂111In－DTPA－D－Phe1－octreotide在体内降解产物为111In－DTPA，给药后3h血中111In－DTPA占血中放射性的50％，尿中为40％。正常鼠与载胰腺癌裸鼠的动物实验表明：该显像剂的血液清除很快，注射后10min血液的％ID／g为注射后1min的50％；放射性主要从泌尿系统排泄，给药后4min膀胱显影，至30min双肾和膀胱的放射性含量达50％ID；T／B比值在给药后逐渐增高，至24h可达7．92；给药后0．5－24h均可进行载胰腺癌裸鼠模型上的肿瘤阳性显像，24h时相的图像质量最佳。     

125I-RC-160的标记及与NCI-H446细胞体外受体结合特性的研究

为探索高比活度12 5I -生长抑素类似物 (RC - 160 )的制备及与小细胞肺癌 (SCLC)细胞株-NCI-H4 46体外受体结合特性。12 5I -RC - 160采用氯胺T法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,硅胶纸层析检测。12 5I-RC - 160与NCI -H4 46细胞进行体外结合实验、饱和结合实验和竞争结合实验。12 5I -RC - 160标记率为 5 4.34 % ,比活度 1.85TBq/ (mmol·L- 1) ,放射化学纯度 (RCP)为 92 % ;Scatchard作图提示 ,Kd 为 1.71× 10 - 10 mol/L ,Bmax为 1.0 6× 10 5个 /细胞。制备的12 5I -RC - 160达到体外受体配体结合分析的标准 ;12 5I-RC - 160与NCI -H4 46的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异 ;12 5I -RC - 160与NCI -H4 46细胞生长抑素受体的结合符合单位点系统。     

原发性乳腺癌SSTR1-3mRNA分布特性的研究

为研究生长抑素受体三种亚型（ＳＳＴＲ１－３）在原发性乳腺癌中的分布特性,以［ａ－＾３５Ｓ］ｄＡＴＰ标记ＳＳＴＲ三种亚型的寡核苷酸为探针,运用原位杂交技术,检测１０例乳腺癌组织中ＳＳＴＲ１－３ｍＲＮＡ的表达模式,并用Ｌｅｉｃａ图像分析仪对表达密度作半定量分析。结果表明,ＳＳＴＲ１－３在乳腺癌中的表达模式以表达ＳＳＴＲ２为主（７／１０）;从ＳＳＴＲ１－３在乳腺癌中的表达密度看,ＳＳＴＲ２高于其它两种亚     

125I-RC-160的标记方法研究及其正常小鼠体内的分布特征

研究了一种高效碘标多肽RC - 16 0的方法 ,在其中以溴代琥珀酰亚胺 (NBS)为氧化剂 ,常规氯胺T法作为对照。对12 5I -RC - 16 0的标记率、比活度进行了评价 ,并观察12 5I -RC - 16 0在正常小鼠体内的生物分布特征。结果显示 :在丙酮:生理盐水 =1:1体系中 ,测得12 5I -RC - 16 0的标记率NBS法为 92 %,比活度为 1.95× 10 12 Bq/mmoL ,标记率随NBS用量增加而增高 ,最佳用量比为RC - 16 0 (μg):12 5I(MBq):NBS(μg) =3:7.4:1,且产物无需纯化 ;Ch -T法标记率为5 6 %,比活度为 0 .6 5× 10 12 Bq/mmoL ,经SepPaK -C18反向色谱柱纯化 ,12 5I -RC - 16 0的标记率可达 92 %。标记物在血中清除较快 ,注射后不到 1h血中的放射性就下降了 87.2 %;12 5I -RC -16 0在甲状腺及肾的浓集度很低 ,主要经过消化系统排出体外。     

生长抑素(SS)基因在大肠杆菌pT7ZZ表达系统中的克隆与表达

目的 构建和筛选既能稳定、高效表达SS融合蛋白，又能使这种融合蛋白保持良好的SS抗原性和高水溶性等特点的重组质粒。方法 用 BamH I/Xho I (B/X）和 BamH I/EcoR I（B/E）双酶切，将含有SS基因的片段由pThioHis A中切出，然后分别克隆到 pT7ZZa中的相应酶切位点，得到pSSB/X（短尾）和pSS-B/E(长尾)两个重组质粒，用常规表达技术在大肠杆菌中对其进行表达。结果 pSS-B/X和pSS-B/E两个重组质粒在宿主菌BL21（DE3）中均获得表达，pSS-B/X获得高效表达后融合蛋白占菌体总蛋白的30．6％。两个表达菌经超声裂解后电泳发现，SS－B/X－ZZ和SS－B/E－ZZ这两种融合蛋白基本为可溶性蛋白，沉淀中含量极低。二者均具有良好的抗原性，结论pSS-B/X重组质粒很有希望成为SS基因疫苗的候选质粒。     

重组生长抑素(SS)大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果

［摘 要］目的 验证重组SS大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果。方法 由SS融合蛋白与弗氏不完全佐剂制成实验用疫苗，皮下注射BALB/c小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪和羔羊等动物，并观察体重变化。结果 与Vector Vaccine相比，Vaccine－1和 Vaccine－2可分别使雌性小鼠提高增重 10．28％和 15．63％；对雄性小鼠的作用不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫去势仔公猪，免疫后89天提高增重7．2％;免疫初产母猪，所产28日龄仔猪可比载体对照组仔猪提高增重11．81％，比44日龄仔猪提高增重17．95％；免疫母羔羊58天可比载体对照组提高增重15．64％，90天提高增重28．2％；免疫公羔羊变化不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫小鼠，其血清中抗因抗体阳性率为75％。结论 重组SS大肠杆菌疫苗能促进雌性小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪所产仔猪和母羔羊增重，但对雄性小鼠和公羔羊无作用。