| 人黏蛋白1串联重复区基因真核表达载体的构建及其在动物细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 张淑子,张娲,张海红,吴永革,于湘晖,孔维.人黏蛋白1串联重复区基因真核表达载体的构建及其在动物细胞中的表达[J].粉末涂料与涂装,2007,20(9):642-645. |
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| 作者姓名： | 张淑子 张娲 张海红 吴永革 于湘晖 孔维 |
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| 作者单位： | [1]吉林大学生命科学学院疫苗研究中心,长春130012 [2]吉林亚泰生物药业股份有限公司研发部,长春130033 |
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| 摘 要： | 目的构建人黏蛋白1串联重复区(MUC1 VNTR)17重复序列肿瘤抗原真核表达载体,并在COS-7、HeLa和Lewis细胞中表达。方法设计1对分别含SalⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物,PCR法合成1重复MUC1 VNTR片段,克隆入pGEM-Teasy载体,依据SalⅠ和XhoⅠ酶切产生相同黏性末端的特性,依次连接,构建17重复MUC1 VNTR(17m),再亚克隆至VR1012真核表达载体,构建真核表达质粒VR1012-17m。分别转染COS-7、HeLa和Lewis细胞,并进行检测。结果酶切鉴定和序列分析证实,构建的重组质粒含17m序列,经转染的COS-7、HeLa和Lewis细胞,RT-PCR检测均有17m mRNA转录,Western blot检测均有17m蛋白的表达,并与MUC1 VNTR单抗产生特异性反应。结论已成功构建17m肿瘤抗原真核表达载体,并在COS-7、HeLa和Lewis细胞中得到表达,可用于MUC1疫苗和肿瘤生物学治疗的进一步研究。
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| 关 键 词： | 黏蛋白 串联重复区 真核表达 肿瘤抗原 肿瘤疫苗 |
| 文章编号： | 1004-5503（2007）09-642-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-07 |
| 修稿时间： | 2006年11月7日 |
Construction of Eukaryotic Vector for Expression of Gene Encoding Tandem Repeats of Human Mucin 1 in Mammalian Cells |
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| ZHANG Shu-zi , ZHANG Wa, ZHANG Hai-hong, et al.Construction of Eukaryotic Vector for Expression of Gene Encoding Tandem Repeats of Human Mucin 1 in Mammalian Cells[J].Chinese Journal of Biologicals,2007,20(9):642-645. |
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| Authors: | ZHANG Shu-zi ZHANG Wa ZHANG Hai-hong |
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| Affiliation: | Vaccine Research Center, College of Life Science, Jilin University, Changchun 130012, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mucin Tandem repeat Eukaryotic expression Tumor antigen Tumor vaccine |
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