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解淀粉芽孢杆菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其酶学表征
作者姓名:陈宝莉  秦臻  赵黎明
作者单位:华东理工大学生物工程学院发酵工业分离提取技术研发中心生物反应器工程国家重点实验室
基金项目:上海市教育委员会和上海市教育发展基金会“曙光计划”项目(15SG28);;高等学校学科创新引智计划项目(B18022);
摘    要:从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens YX-01)中克隆得到一个新型β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因(BaNagase),并成功在大肠杆菌中异源表达。BaNagase编码616个氨基酸,与B. subtilis来源的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(AIY91451.1)氨基酸序列相似性最高,为76.97%。通过对比分析,BaNagase属于糖苷水解酶3家族。纯化获得的BaNagase比活力为16.42 U/mg,最适温度65℃,最适pH 6.0,且在低于55℃条件下能保持高于70%的酶活力。BaNagase展现出高的热稳定性和严格的底物特异性,为其高效制备N-乙酰氨基葡萄糖提供了理论支持。

关 键 词:N-乙酰氨基葡萄糖苷酶  解淀粉芽孢杆菌  克隆  酶学性质  糖苷水解酶3家族
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