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盐酸可乐定人工抗原的合成及鼠源多抗血清ELISA鉴定
引用本文:王耀,曹金博,李铁梅,庞杏豪,胡骁飞. 盐酸可乐定人工抗原的合成及鼠源多抗血清ELISA鉴定[J]. 食品与机械, 2021, 37(7): 76-80
作者姓名:王耀  曹金博  李铁梅  庞杏豪  胡骁飞
作者单位:河南科技大学食品与生物工程学院,河南 洛阳 471003;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002;西北农林科技大学动物医学院,陕西 咸阳 712100;中国检验检疫科学研究院,北京 100176
基金项目:国家自然科学基金(编号:31702218);国家级大学生创新创业训练计划(编号:202010464024);河南省青年人才托举工程(编号:2020HYTP029);河南省动物免疫学重点实验室开放课题(编号:PKLAI20170603);河南省科技攻关(编号:182102110445);河南省自然科学基金(编号:182300410038);河南省农业科学院科研发展专项资金(编号:2019CY04)
摘    要:目的:获得敏感性高,特异性强的新型瘦肉精盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride,CLO)鼠源多抗血清。方法:以CLO的衍生物盐酸阿可乐定(Apraclonidine hydrochloride,ACLO)为半抗原,采用戊二醛法将ACLO分别与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联,合成免疫抗原CLO-BSA和包被抗原CLO-OVA。采用紫外扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其偶联效果后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清。利用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其免疫学特性。结果:合成的人工抗原免疫效果较好,所获小鼠多抗血清效价均达到1∶12 800以上,其中3号小鼠敏感性最好,半数抑制质量浓度(IC50)为82.75 ng/mL,与其他几种常见的瘦肉精类药物的交叉反应率均小于0.9%,特异性良好。结论:通过戊二醛法成功合成了高免疫原性的CLO人工抗原,并获得敏感性高,特异性强的CLO鼠源多抗血清。

关 键 词:盐酸可乐定;人工抗原;多抗血清;ELISA
收稿时间:2020-06-14

Synthesis of artificial antigen and ELISA identification of mouse polyclonal antiserum against clonidine hydrochloride
WANGYao,CAOJinbo,LITiemei,PANGXinghao,HUXiaofei. Synthesis of artificial antigen and ELISA identification of mouse polyclonal antiserum against clonidine hydrochloride[J]. Food and Machinery, 2021, 37(7): 76-80
Authors:WANGYao  CAOJinbo  LITiemei  PANGXinghao  HUXiaofei
Affiliation:Food and Bioengineering College, Henan University of Science and Technology, Luoyang, Henan 471003, China;Key Laboratory of Animal Immunology, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou, Henan 450002, China; College of Veterinary Medicine, Northwest A&F University, Xianyang, Shaanxi 712100, China;Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100176, China
Abstract:
Keywords:clonidine hydrochloride   artificial antigen   polyclonal antiserum   ELISA
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