基于毛细管凝胶电泳的寡核苷酸纯度分析方法 |
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作者姓名: | 王乐乐 张晓霞 刘刚 |
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作者单位: | 上海市计量测试技术研究院国家市场监管重点实验室(生物分析计量溯源),上海201203;SCIEX,北京100015 |
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基金项目: | 上海市市场监督管理局科技项目;上海市市场监督管理局科技项目 |
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摘 要: | 在寡核苷酸的化学合成过程中,会产生与全长序列相差一个(n-1)和两个核苷酸(n-2)的杂质,因为分子质量及电荷性质与主成分差异小,难以准确定量检测。毛细管凝胶电泳具有样品用量少、速度快、灵敏度高、分离效果好、自动化程度高等优势,而普遍应用于核酸的分离和分析。采用毛细管凝胶电泳对寡核苷酸纯度进行分析,能有效分离寡核苷酸全长序列与n-1的杂质,在0.03~1.00 mg/L浓度范围内线性良好(R2=0.998 8),检出限约为0.01 mg/L(信噪比S/N>3),该方法的建立将为寡核苷酸的纯度分析与质量控制提供有力的技术支撑。
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关 键 词: | 计量学 毛细管凝胶电泳 寡核苷酸 纯度分析 单核苷酸 分辨率 |
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