大肠杆菌链长控制基因ddsA原位替换及多基因共表达对辅酶Q10合成能力的影响 |
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引用本文: | 孔璐,傅楠,叶江,吴海珍,张惠展. 大肠杆菌链长控制基因ddsA原位替换及多基因共表达对辅酶Q10合成能力的影响[J]. 食品与药品, 2009, 11(5) |
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作者姓名: | 孔璐 傅楠 叶江 吴海珍 张惠展 |
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作者单位: | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237 |
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摘 要: | 目的 强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力.方法 利用途径工程的基本原理,对大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中链长控制基因ispB进行遗传操作,并强化表达该途径中多个功能基因.结果 首次成功用来自Gluconobacter suboxydans的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因,构建得到原位替换株JKL;同时强化表达CoQ生物合成途径的相关基因,发现在ubiCA和ddsA协同表达的重组菌pDCA/JKL中CoQ的合成能力比JKL提高了2.3倍,CoQ10合成量提高了2.5倍.检测该重组菌中ubiA的转录水平,发现其mRNA相对拷贝数是对照JKL的125倍.结论 成功获得的重组大肠杆菌在降低内源性CoQ8合成能力的同时具备合成较长侧链CoQ10的能力,且通过强化表达相关基因使合成CoQ10的能力得到了提高.
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关 键 词: | 大肠杆菌 基因替换 共表达 辅酶Q10 |
Influence of Gene Substitution with Gluconobacter Suboxydans ddsA and Multi-gene Co expression on Production of Ubiquinone-10 in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | ddsA qRT-PCR |
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