2种食源性致病菌多重荧光PCR检测方法的建立

文章旨在建立一种可同时快速检测食品中沙门氏菌和副溶血弧菌的TaqMan双重荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)检测方法。分别针对沙门氏菌的inv A基因和副溶血弧菌的tlh基因序列的保守片段，设计了特异性检测引物和探针，并优化其使用浓度及反应退火温度，建立双重荧光定量PCR检测体系，并对方法的灵敏度、特异性及稳定性进行评估。结果显示：建立的双重荧光定量PCR检测法可特异性扩增沙门氏菌和副溶血弧菌，其他菌株无扩增。沙门氏菌检测灵敏度最低检测值可达1 copies/μL，副溶血弧菌检测灵敏度为10 copies/μL。批内批间变异系数均<2%，重复性和稳定性较好，与传统方法检测结果一致，检测时长大幅度缩短。综上表明，建立的双重荧光PCR检测方法能够快速、准确地检测出食品中沙门氏菌和副溶血弧菌，为食品中食源性致病菌的快速检测提供技术支持。