| 莱茵衣藻IFT20的原核表达、纯化及多克隆抗体鉴定 |
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| 引用本文： | 贾瑞勤,贾航,郑学超,薛斌,樊振川.莱茵衣藻IFT20的原核表达、纯化及多克隆抗体鉴定[J].食品与生物技术学报,2023,42(11):106-112. |
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| 作者姓名： | 贾瑞勤 贾航 郑学超 薛斌 樊振川 |
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| 作者单位： | 天津科技大学 食品营养与安全国家重点实验室，天津 300457;天津科技大学 生物工程学院，天津 300457;天津科技大学 生物工程学院，天津 300457; 天津科技大学 大健康生物技术国家国际科技合作基地，天津 300457 |
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| 摘 要： | 莱茵衣藻鞭毛内运输（intraflagellar transport, IFT）蛋白IFT20是IFT蛋白复合物B（IFT-B）的组分之一。虽然IFT20参与调控细胞内大分子的胞内运输过程，但其作为一个鞭毛蛋白在鞭毛内的详细功能仍有待研究。为了开发高特异性的莱茵衣藻IFT20兔源多克隆抗体，作者首先在大肠杆菌中表达了N端6×His标签标记的IFT20融合蛋白（6×His::IFT20），并对其进行镍柱纯化，将纯化所得6×His::IFT20蛋白免疫新西兰大白兔。采集3次免疫后的抗血清，利用间接ELISA法测定其效价为1∶102 400。利用protein A纯化珠对所得抗血清进行了IgG亚型抗体富集，接着用大肠杆菌表达纯化所得N端MBP标签标记的IFT20（MBP::IFT20），并对IgG抗血清进行抗原抗体亲和纯化。经对CC-125藻种全细胞蛋白质提取物进行免疫印迹法鉴定，所得IFT20多克隆抗体特异性较高，适合用于后续莱茵衣藻IFT20鞭毛内运输功能的研究。
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| 关 键 词： | 莱茵衣藻 鞭毛内运输 IFT20 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression, Purification, and Polyclonal Antibody Identification of Chlamydomonas reinhardtii IFT20 |
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| JIA Ruiqin,JIA Hang,ZHENG Xuechao,XUE Bin,FAN Zhenchuan.Prokaryotic Expression, Purification, and Polyclonal Antibody Identification of Chlamydomonas reinhardtii IFT20[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2023,42(11):106-112. |
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| Authors: | JIA Ruiqin JIA Hang ZHENG Xuechao XUE Bin FAN Zhenchuan |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China;College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China;College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China; China International Science & Technology Cooperation Base for Health Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chlamydomonas reinhardtii intraflagellar transport IFT20 polyclonal antibody |
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