| 蛇毒类凝血酶基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张红梅,文姝,许晓楠,安利佳.蛇毒类凝血酶基因真核表达载体的构建[J].粉末涂料与涂装,2003,16(3):161-164. |
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| 作者姓名： | 张红梅 文姝 许晓楠 安利佳 |
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| 作者单位： | 大连理工大学生物工程系，大连理工大学生物工程系，大连理工大学生物工程系，大连理工大学生物工程系 大连 116012，大连 116012，大连 116012，大连 116012 |
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| 摘 要： | 目的 构建大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin,GSB)基因真核表达载体,试图借助IL-2的分泌通路,使GSB分泌至胞外而达到溶栓和防栓的目的。方法 应用PCR重组技术,将GSB的5’端和3’端分别与IL-2基因的信号肽和poly A尾相连接,将此重组基因克隆入逆转录病毒载体 pLNCX,以脂质体介导转染人外用血淋巴细胞,并以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因检测转染效率、确定DNA和脂质体的比例。转染24h后从mR-NA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果 mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达;SDS-PAGE显示在相对分子质量 30 000左右出现一条带,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。结论 构建的真核表达载体可表达具有活性的GSB,为GSB基因治疗血栓的体内研究打下基础。
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| 关 键 词： | 基因治疗 大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶 血栓 淋巴细胞 |
| 修稿时间： | 2003年1月12日 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector for Gloshedobin |
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| ZHANG Hongmei,WEN Shu,XU Xiaonan et al.Construction of Eukaryotic Expression Vector for Gloshedobin[J].Chinese Journal of Biologicals,2003,16(3):161-164. |
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| Authors: | ZHANG Hongmei WEN Shu XU Xiaonan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene therapy Gloshedobin Peripheral blood Lymphocyte |
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