| 具有极高热稳定性的β-（2，6）果聚糖蔗糖酶及其应用 |
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| 引用本文： | 张晓琦,徐炜,倪大伟,张文立,光翠娥,沐万孟.具有极高热稳定性的β-（2，6）果聚糖蔗糖酶及其应用[J].食品与生物技术学报,2023,42(4):57-68. |
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| 作者姓名： | 张晓琦 徐炜 倪大伟 张文立 光翠娥 沐万孟 |
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| 作者单位： | 食品科学与技术国家重点实验室，江南大学，江苏 无锡 214122;食品科学与技术国家重点实验室，江南大学，江苏 无锡 214122; 江南大学 食品安全国际合作联合实验室，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 挖掘具有高热稳定性的β-（2，6）果聚糖蔗糖酶（levansucrase，LS），并应用果聚糖蔗糖酶进行β-（2，6）果聚糖的高效合成。以分子动力学模拟的方式筛选出具有潜在高热稳定性的β-（2，6）果聚糖蔗糖酶。将目的酶在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中进行重组及诱导表达，并通过镍柱亲和层析进行纯化。在不同温度下进行保温实验以验证LS的热稳定性，并通过条件优化获得产物的高转化率。Cedi-LS在65 ℃时显示出最高活性，远高于已鉴定的其他LS。同时，在45 ℃下保温72 h，重组酶Cedi-LS能够保留90%以上的相对活性；在55 ℃下保温60 h，其保留活性仍可达到初始活性的60%以上，表现出优异的热稳定性。在反应过程中，Cedi-LS可同时生成低聚糖、低相对分子质量的β-（2，6）果聚糖和高相对分子质量的β-（2，6）果聚糖。当温度从65 ℃降至35 ℃时，Cedi-LS倾向于产生HMW-levan，其相对分子质量可达8.4×106。在pH 5.5和35 ℃的条件下，以质量分数30%的蔗糖为底物，加酶量定20 μg/mL，蔗糖转化为β-（2，6）果聚糖的平衡转化率为41.4%。作者鉴定了一种具有高热稳定性的LS，并且这种LS能够高效生产一系列具有不同相对分子质量的果聚糖。
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| 关 键 词： | β-（2，6）果聚糖蔗糖酶 热稳定性 β-（2，6）果聚糖 产物特异性 |
An Extreme Thermostable Levansucrase and Its Application |
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| ZHANG Xiaoqi,XU Wei,NI dawei,ZHANG Wenli,GUANG Cuie,MU Wanmeng.An Extreme Thermostable Levansucrase and Its Application[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2023,42(4):57-68. |
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| Authors: | ZHANG Xiaoqi XU Wei NI dawei ZHANG Wenli GUANG Cuie MU Wanmeng |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China; State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China; International Joint Laboratory on Food Safety, Jiangnan University, Wuxi 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | levansucrase thermostability levan product specificity |
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