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酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺优化及其抑制机制
引用本文:汤海霞,张艳,葛武鹏,宋宇轩,王海燕,王爽爽. 酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺优化及其抑制机制[J]. 中国食品学报, 2022, 22(6): 220-231
作者姓名:汤海霞  张艳  葛武鹏  宋宇轩  王海燕  王爽爽
作者单位:西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌 712100;富平县检验检测中心 陕西省羊乳产品质量监督检验中心 陕西富平 711700;西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌 712100
基金项目:陕西省重点研发计划项目 (2021ZDLNY02-09)
摘    要:为优化酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺条件以及筛选和鉴定一种新的ACE抑制肽,选用5种蛋白酶水解酪蛋白,以水解度、分子质量分布和ACE抑制率为指标筛选最适蛋白酶,采用单因素和响应面试验优化工艺,采用三合一质谱仪(Orbitrap Fusion Lumos Tribrid MS)方法鉴定分子质量小于3 ku组分的氨基酸序列,筛选潜在ACE抑制肽,进行人工合成,测定其IC50值。采用Linewaver-Burk作图确定酶抑制动力学,结合分子对接解析肽段的抑制机制。结果表明:碱性蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件为pH 6、底物含量8%、酶添加量4%、温度55 ℃、水解时间90 min,此时酪蛋白水解液ACE抑制率为99.1%。验证具有ACE抑制活性的肽段10条,筛选出一条新颖的降血压肽——LFRQFY(源自αs1-酪蛋白),其ACE抑制活性的IC50为(7.9±1.7)μmol/L,酶抑制动力学为混合抑制模式。分子对接结果表明:LFRQFY能与ACE的氨基酸残基Ala354(活性口袋S1)、His353(活性口袋S2)形成氢键,具有显著的体外降血压活性。

关 键 词:ACE抑制肽; 绵羊乳; 分子质量分布; 分子对接; 响应面
收稿时间:2021-06-19

Optimization of Enzymatic Preparation of ACE Inhibitory Peptide from Sheep Milk Casein and Its Inhibition Mechanism
Tang Haixi,Zhang Yan,Ge Wupeng,Song Yuxuan,Wang Haiyan,Wang Shuangshuang. Optimization of Enzymatic Preparation of ACE Inhibitory Peptide from Sheep Milk Casein and Its Inhibition Mechanism[J]. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2022, 22(6): 220-231
Authors:Tang Haixi  Zhang Yan  Ge Wupeng  Song Yuxuan  Wang Haiyan  Wang Shuangshuang
Abstract:
Keywords:
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