| 四价脑膜炎球菌多糖单克隆抗体的制备及其应用 |
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| 引用本文： | 张萍萍,邓捷,张小刚,孙哲,朱涛.四价脑膜炎球菌多糖单克隆抗体的制备及其应用[J].粉末涂料与涂装,2015(3):291-296. |
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| 作者姓名： | 张萍萍 邓捷 张小刚 孙哲 朱涛 |
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| 作者单位： | 北京天成新脉生物技术有限公司;天津康希诺生物技术有限公司;京天成生物技术(北京)有限公司;天津科技大学 |
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| 基金项目： | 863计划(2012AA02A401) |
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| 摘 要： | 目的制备四价脑膜炎球菌多糖的单克隆抗体,并将其应用于速率散射比浊试验。方法分别用A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖(meningococcal polysaccharides of group A,C,W135 and Y,分别简写为GAMP、GCMP、GWMP、GYMP)与白喉毒素无毒变异体CRM197结合物(GAMP-CRM197、GCMP-CRM197、GWMP-CRM197、GYMP-CRM197)免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株,对阳性细胞株进行特异性检测及纯化抗体效价检测。每种血清群选1株单抗,用于速率散射比浊试验定标。结果分别获得稳定分泌抗GAMP、GCMP、GWMP、GYMP细胞株20、18、9和13株,其中抗GAMP特异性单抗5株,抗GCMP特异性单抗5株,抗GWMP特异性单抗3株,抗GYMP特异性单抗5株,均与CRM197及其他3个血清群多糖无交叉反应。抗GAMP纯化抗体效价均>1∶4 000 000,抗GCMP纯化抗体效价均>1∶200 000,抗GWMP纯化抗体效价均可达1∶40 000,抗GYMP纯化抗体效价均可达1∶40 000。抗GAMP单抗6B7和抗GCMP单抗2H4在标准品浓度2~10μg/ml范围内,可用于速率散射比浊试验定标,R2分别为0.990 9和0.991 9;抗GWMP单抗5F1在标准品浓度4.33~21.7μg/ml范围内,可用于速率散射比浊试验定标,R2为0.851 8;抗GYMP单抗7C6在标准品浓度1~8μg/ml范围内,可用于速率散射比浊试验定标,R2为0.998 7。结论成功制备了四价脑膜炎球菌多糖特异性单抗,并应用于速率散射比浊试验。
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| 关 键 词： | 脑膜炎球菌 荚膜多糖 单克隆抗体 速率散射比浊试验 |
Preparation and application of monoclonal antibodies against capsular polysaccharides of Neisseria meningitides serogroups A,C, W135 and Y |
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| ZHANG Ping-ping;DENG Jie;ZHANG Xiao-gang;SUN Zhe;ZHU Tao.Preparation and application of monoclonal antibodies against capsular polysaccharides of Neisseria meningitides serogroups A,C, W135 and Y[J].Chinese Journal of Biologicals,2015(3):291-296. |
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| Authors: | ZHANG Ping-ping;DENG Jie;ZHANG Xiao-gang;SUN Zhe;ZHU Tao |
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| Affiliation: | ZHANG Ping-ping;DENG Jie;ZHANG Xiao-gang;SUN Zhe;ZHU Tao;Ab Max Biotechnology Co. Ltd.; |
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