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环介导等温扩增法检测棘颚口线虫方法的建立
引用本文:张森,邓艳,黄燕琼,何淑华,戴金,陈增荣,石磊,柏建山.环介导等温扩增法检测棘颚口线虫方法的建立[J].现代食品科技,2016,32(38):308-313.
作者姓名:张森  邓艳  黄燕琼  何淑华  戴金  陈增荣  石磊  柏建山
作者单位:(1.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州 510640)(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470),(3.暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州 510632),(2.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470)
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK055);广东出入境检验检疫局科技项目(2014GDK25)
摘    要:棘颚口线虫是引起人体颚口线虫病最主要的病原,其引起的病例呈世界性分布。由于其复杂的生活史,以及不同生长阶段形态的变化差异,传统的形态学鉴定方法很难鉴别。为了快速、灵敏和可靠的鉴定棘颚口线虫,本研究建立了一套检测棘颚口线虫的DNA环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。根据LAMP方法原理,针对棘颚口线虫的ITS2 rDNA设计了三套特异性引物特异性识别靶基因。进行了特异性、灵敏度、稳定性和实际样品的测试。结果表明,该方法对棘颚口线虫DNA能够特异性扩增,而比对虫体DNA均无扩增;对含有棘颚口线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA的检测限为1 fg/μL,比传统的PCR方法灵敏度高100倍;对51批次实际样品的进行检测,LAMP方法与传统的PCR测序方法结果相符。本研究设计的LAMP检测方法适用于特异性检测棘颚口线虫。

关 键 词:环介导等温扩增技术(LAMP)  棘颚口线虫  快速检测
收稿时间:1/4/2016 12:00:00 AM

Sensitive and Rapid Detection of Gnathostoma spinigerum by Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP)
ZHANG Sen,DENG Yan,HUANG Yan-qiong,HE Shu-hu,DAI Jin,CHEN Zeng-rong,SHI Lei and BAI Jian-shan.Sensitive and Rapid Detection of Gnathostoma spinigerum by Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP)[J].Modern Food Science & Technology,2016,32(38):308-313.
Authors:ZHANG Sen  DENG Yan  HUANG Yan-qiong  HE Shu-hu  DAI Jin  CHEN Zeng-rong  SHI Lei and BAI Jian-shan
Affiliation:(1.School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) (2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China),(3.Research Institute of Food Safety and Nutrition, Jinan University, Guangzhou 510632, China) and (2.State Key Testing Laboratory of Aquatic Products, Guangzhou Airport Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510470, China)
Abstract:
Keywords:loop-mediated isothermal amplification  Gnathostoma spinigerum  rapid detection
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