| 饱和突变提高肌酸酶热稳定性 |
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| 引用本文： | 阮洁,刘松,李江华,堵国成,陈坚. 饱和突变提高肌酸酶热稳定性[J]. 食品与生物技术学报, 2019, 38(10): 8-14 |
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| 作者姓名： | 阮洁 刘松 李江华 堵国成 陈坚 |
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| 作者单位： | 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 为提高肌酸酶(Creatinase,EC 3.5.3.3,CRE)的热稳定性,通过序列比对的方法确定了Arthrobacter nicotianae 23710 CRE热稳定性相关位点K195,并对其进行饱和突变。与野生酶相比,突变体K195V、K195T、K195C和K195L在50℃下的半衰期分别提高260%、 230%、60%和20%;其中,K195V和K195C比酶活分别提高80.7%和88.2%,其他突变体比酶活无明显变化;突变体K195V、K195T、K195C和K195L的催化效率(k_(cat)/K_m)分别提高131%、 218%、 83%和100%。结构分析发现,突变体K195V、 K195T、 K195L较野生酶分别增加了7、12和13个氢键。结果表明:对Lys195的突变可有效改变CRE的热稳定性及催化效率,且分子内部氢键的增加可能是CRE热稳定性提高的重要原因之一。
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| 关 键 词： | 肌酸酶；热稳定性；饱和突变；分子改造；氢键 |
Improvement of Creatinase Thermal Stability Through Saturation Mutagenesis |
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| RUAN Jie,LIU Song,LI Jianghu,DU Guocheng and CHEN Jian. Improvement of Creatinase Thermal Stability Through Saturation Mutagenesis[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2019, 38(10): 8-14 |
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| Authors: | RUAN Jie LIU Song LI Jianghu DU Guocheng CHEN Jian |
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