| 谷氨酰胺酶基因的克隆、表达和酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 张美丹,饶志明,张显,杨套伟,徐美娟.谷氨酰胺酶基因的克隆、表达和酶学性质研究[J].食品与生物技术学报,2019,38(10):60-66. |
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| 作者姓名： | 张美丹 饶志明 张显 杨套伟 徐美娟 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 以枯草芽孢杆菌基因组为模板通过PCR扩增获得谷氨酰胺酶基因ylaM,构建重组质粒p MA5-ylaM,将其转化到枯草芽孢杆菌168中获得重组菌BS168/pMA5-ylaM,并在宿主菌成功得到表达,纯化后的谷氨酰胺酶比酶活大小为939.48 U/mg。谷氨酰胺酶的反应最适pH为7.5,反应最适温度为55℃,La~(3+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)和Al~(3+)对谷氨酰胺酶活力具有一定的抑制作用,在NaCl浓度为15%～17.5%的条件下,该酶酶活力可以保留50%以上。在5 L罐中,通过分批补料发酵,其最高酶活力产量为215.06 U/mL。
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 谷氨酰胺酶 酶学性质 |
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