| 筛选降尿酸肽的体外测定方法的建立与优化 |
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| 引用本文： | 杨柳,康小燕,梁明,张婷,任娇艳. 筛选降尿酸肽的体外测定方法的建立与优化[J]. 现代食品科技, 2018, 34(4): 249-257 |
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| 作者姓名： | 杨柳 康小燕 梁明 张婷 任娇艳 |
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| 作者单位： | 华南理工大学食品科学与工程学院;无限极(中国)有限公司 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（31671804）；“广东特支计划”科技青年拔尖人才项目（2014TQ01N645）；广东省科技计划项目（2017B090901063、2015B020230001）；广州市产学研协同创新重大专项（201604020047）；中央高校基本科研业务费项目（2017ZD079） |
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| 摘 要： | 由于紫外分光光度法、NBT/PMS显色法、荧光分析法,MTS/PMS还原法等黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性检测方法对多肽检测的局限性,本文建立了适用于筛选降尿酸多肽类物质的体外测定方法,采用双酶偶联法联合高效液相色谱法(HPLC法)测定多肽类物质的体外黄嘌呤氧化酶抑制活性。以双酶偶联法优化样品测定的反应体系,得到最适反应条件:黄嘌呤浓度0.22 mmol/L,酶浓度0.52 u/m L,缓冲液pH 8.0,反应温度30℃,反应时间20 min;优化尿酸分离的液相条件,确定最适检测条件:95%15 mmol/L NH4H2PO4+5%甲醇,pH 6.5,流速1 m L/min,柱温25℃,检测波长290 nm。实验表明,最适条件下双酶偶联法和HPLC法检测精密度良好,准确度达95%以上。双酶偶联法联合HPLC法可高效、准确进行多肽降尿酸活性检测。双酶偶联法联合HPLC法证明还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)具有黄嘌呤氧化酶抑制活性,可作为降尿酸肽。
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| 关 键 词： | 多肽；体外检测；尿酸；双酶偶联法；HPLC法；黄嘌呤氧化酶 |
| 收稿时间： | 2017-10-22 |
Establishment and Optimization of an In-vitro Method for Screening Anti-hyperuricemic Peptides |
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| YANG Liu,KANG Xiao-yan,LIANG Ming,ZHANG Ting and REN Jiao-yan. Establishment and Optimization of an In-vitro Method for Screening Anti-hyperuricemic Peptides[J]. Modern Food Science & Technology, 2018, 34(4): 249-257 |
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| Authors: | YANG Liu KANG Xiao-yan LIANG Ming ZHANG Ting REN Jiao-yan |
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| Affiliation: | (1.School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China),(1.School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China),(2.Infinitus (China) Com. Ltd. Guangzhou 510000, China),(2.Infinitus (China) Com. Ltd. Guangzhou 510000, China) and (1.School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | peptides in vitro test uric acid double-enzyme coupling method HPLC method xanthine oxidase |
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