| 叠氮溴化丙锭-qPCR法定量检测植物乳杆菌 |
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| 引用本文： | 马 丹,杨彬彬,陶文靖,郭敏卓,张 捷,魏咏新,李 丹,魏海燕,曾 静. 叠氮溴化丙锭-qPCR法定量检测植物乳杆菌[J]. 食品安全质量检测学报, 2021, 12(12): 4867-4875 |
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| 作者姓名： | 马 丹 杨彬彬 陶文靖 郭敏卓 张 捷 魏咏新 李 丹 魏海燕 曾 静 |
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| 作者单位： | 中国海关科学技术研究中心,优合集团有限公司,北京美正生物科技有限公司,中国海关科学技术研究中心,中国海关科学技术研究中心,中国海关科学技术研究中心,中国海关科学技术研究中心,中国海关科学技术研究中心,中国海关科学技术研究中心 |
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| 基金项目： | 海关总署科研项目(2019HK098) |
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| 摘 要： | 目的：选取植物乳杆菌单拷贝基因plnF为靶基因,设计引物探针,将叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)相结合,建立了活性植物乳杆菌定量检测PMA-qPCR方法。方法：优化PMA反应条件,进行特异性验证,建立标准曲线,验证灵敏度,并将该方法用于检测人工添加奶粉、米粉、酸奶样品以及冻干样品中的植物乳杆菌。结果：显示经PMA条件优化,最佳PMA浓度为2μg/mL,最佳曝光时间为10min,所建立的PMA-qPCR方法可以快速、高效地检测植物乳杆菌,利用细菌纯培养物与对应Ct值建立标准曲线,可以看出纯培养物浓度与Ct值之间存在对应线性关系,相关系数(r2 )为 0.9992,最低检测限为15拷贝/反应体系,人工添加样品以及冻干样品检测中PMA-qPCR和平皿计数法结果的对数值进行配对t检验,结果显示两者结果在不同的人工添加样本以及冻干样品中均无显著性差异(P＞0.05)。结论：本研究建立的PMA-qPCR检测方法能快速准确、特异、灵敏地定量检测植物乳杆菌。
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| 关 键 词： | 叠氮溴化丙锭 植物乳杆菌 实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2021-05-06 |
| 修稿时间： | 2021-05-28 |
Quantitative detection of Lactobacillus plantarum by propidium monoazide-qPCR |
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| MA Dan,YANG Bin-Bin,TAO Wen-Jing,GUO Min-Zhuo,ZHANG Jie,WEI Yong-Xin,LI Dan,WEI Hai-Yan,ZENG Jing. Quantitative detection of Lactobacillus plantarum by propidium monoazide-qPCR[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2021, 12(12): 4867-4875 |
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| Authors: | MA Dan YANG Bin-Bin TAO Wen-Jing GUO Min-Zhuo ZHANG Jie WEI Yong-Xin LI Dan WEI Hai-Yan ZENG Jing |
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| Affiliation: | Science and Technology Research Center of China Customs,Optima Integration Group,Beijing Meizheng Bio-Tech Co.,Ltd,Science and Technology Research Center of China Customs,Science and Technology Research Center of China Customs,Science and Technology Research Center of China Customs,Science and Technology Research Center of China Customs,Science and Technology Research Center of China Customs,Science and Technology Research Center of China Customs |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Propidium monoazide(PMA) Lactobacillus plantarum Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(qPCR) |
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