明串珠菌的稳定高效电转化

明串珠菌电转化的再现性差、效率稍低,因此重新优化了电转化方法。以pCW4为载体,明串珠菌为受体菌,固定接菌量和氨苄浓度,优化了PBS溶液的pH值、LiAc-DTT孵育时间、溶菌酶的量和孵育液中蔗糖浓度。利用MRS(含质量浓度0.48 mg·L-1氨苄)培养明串珠菌(初始OD600为0.048),OD600为0.5左右时收集菌体,用LiAc-DTT溶液(含100 U·mL-1溶菌酶、浓度0.5 mol·L-1蔗糖)孵育20 min,再用pH值为6.9的PBS洗涤和电转化,得到较高的转化率,为2.47×105μg-1DNA。