| 细胞穿膜肽与人表皮生长因子在大肠杆菌中的重组融合表达 |
| |
| 引用本文： | 李风,柯博文,孙中伟,韩双艳. 细胞穿膜肽与人表皮生长因子在大肠杆菌中的重组融合表达[J]. 现代食品科技, 2021, 37(11): 151-158 |
| |
| 作者姓名： | 李风 柯博文 孙中伟 韩双艳 |
| |
| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 510006 |
| |
| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2018YFA0901500） |
| |
| 摘 要： | 该研究构建了细胞穿膜肽Pep-1和人表皮生长因子hEGF融合基因（epEGF）的重组表达质粒PGEX-4T-1-epEGF，并成功转化大肠杆菌BL21（DE3）得到重组大肠杆菌株BL21（DE3）/PGEX-4T1-epEGF。通过IPTG诱导发酵，制备重组融合人表皮生长因子蛋白，并初步尝试建立纯化研究，有效实现了人表皮生长因子（hEGF）在大肠杆菌中的可溶性表达。该研究通过发酵条件优化，发现发酵过程中温度、诱导剂浓度、诱导时间、培养基都是影响蛋白表达量的关键因素；温度在20 ℃、IPTG浓度0.4 mmol/L、诱导时间8 h、培养基为TB液体培养基，目的蛋白占总蛋白的量达到21.58%，蛋白浓度为0.13 mg/mL。菌体破碎液上清经过GST亲和层析融合蛋白纯度达到66.82%，阴离子交换层析后融合蛋白纯度达到92.57%。该研究成功在大肠杆菌中表达出可溶形式的hEGF，且纯化工艺较简单，为hEGF的进一步开发利用提供了参考。
|
| 关 键 词： | 人表皮生长因子(hEGF) 细胞穿膜肽(CPPs) 融合表达 蛋白分离纯化 |
| 收稿时间： | 2021-03-05 |
Recombinant Fusion Expression of Cell-penetrating Peptide and Human Epidermal Growth Factor in Escherichia coli |
| |
| LI Feng,KE Bowen,SUN Zhongwei,HAN Shuangyan. Recombinant Fusion Expression of Cell-penetrating Peptide and Human Epidermal Growth Factor in Escherichia coli[J]. Modern Food Science & Technology, 2021, 37(11): 151-158 |
| |
| Authors: | LI Feng KE Bowen SUN Zhongwei HAN Shuangyan |
| |
| Affiliation: | (Guangdong Key Laboratory of Fermentation and Enzyme Engineering, School of Biological Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | human epidermal growth factor (hEGF) cell-penetrating peptide (CPPs) fusion expression protein isolation and purification |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《现代食品科技》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《现代食品科技》下载免费的PDF全文 |
