| 体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M |
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| 引用本文： | 刘思颖,王斌,潘力. 体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M[J]. 现代食品科技, 2021, 37(11): 175-184 |
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| 作者姓名： | 刘思颖 王斌 潘力 |
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| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 510006 |
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| 基金项目： | 广东省重点领域研发计划项目（2018B020205002；2020B020226007）；佛山市核心技术攻关项目（1920001000824） |
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| 摘 要： | 为建立体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M（Rebaudioside M，RM），该文分别构建了含有甜叶菊来源的糖基转移酶UGT76G1和水稻来源的糖基转移酶EUGT11以及拟南芥来源的蔗糖合成酶SUS1的重组大肠杆菌，将甜菊苷经一锅法催化合成RM。为提升该体系中限速酶EUGT11的酶活，从而提升整个体外多酶级联反应体系的RM产量，本文将该酶表达质粒的T7启动子核心区域串联，并比较一重、二重、三重和四重启动子启动转录时该酶活性，当三重启动子启动转录时，重组酶EUGT11的酶活力最高，是一重启动子启动转录时的2.13倍，在酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11/3 copies of T7=1:2:6.39的体外多酶级联反应体系中，RM产量为3.79 mmol/L，较酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11=1:2:3的体外多酶级联反应体系中，RM的产量提升了2.35倍。该文成功建立了高效合成RM的体外多酶级联反应体系，为此后工业化酶法合成RM提供理论和数据支持。
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| 关 键 词： | 甜菊糖苷 莱鲍迪苷M 糖基转移酶EUGT11 多重启动子 体外多酶级联反应体系 |
| 收稿时间： | 2021-03-08 |
A Multiple-enzyme Cascade Reaction Strategy in Vitro for Efficient Synthesis of Rebaudioside M |
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| LIU Siying,WANG Bin,PAN Li. A Multiple-enzyme Cascade Reaction Strategy in Vitro for Efficient Synthesis of Rebaudioside M[J]. Modern Food Science & Technology, 2021, 37(11): 175-184 |
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| Authors: | LIU Siying WANG Bin PAN Li |
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| Affiliation: | (School of Biology and Biological Engineering, Guangdong Provincial Key Laboratory of Fermentation and Enzyme Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | stevioside rebaudioside M UDP-glucosyltransferase EUGT11 mutiple-promoter multiple-enzyme cascade reactionsystem |
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