婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌解旋酶恒温基因扩增检测方法的建立 |
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引用本文: | 周巍,张薇,刘亮,刘东,李永波,田浩,张岩,张志胜.婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌解旋酶恒温基因扩增检测方法的建立[J].食品科学,2014(4). |
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作者姓名: | 周巍 张薇 刘亮 刘东 李永波 田浩 张岩 张志胜 |
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作者单位: | 河北农业大学食品科技学院;河北省食品质量监督检验研究院; |
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基金项目: | 河北省质量技术监督局科技计划项目(100108) |
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摘 要: | 目的:建立一种检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的解旋酶恒温基因扩增方法。方法:根据阪崎克罗诺杆菌ITS基因设计特异性引物,优化解旋酶恒温基因扩增法反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度,人工添加阪崎克罗诺杆菌确定检出限,多种致病菌在建立的解旋酶恒温基因扩增体系中扩增验证特异性,电泳检测扩增产物。结果:解旋酶恒温基因扩增法检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌得到与设计序列长度一致的100 bp基因片段,检出限为10 CFU/g,优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的终浓度分别为0.1、5.0μg。结论:解旋酶恒温基因扩增法用于检测婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的特异性强、灵敏度高、耗时短,为婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌的快速检测提供了新的方法。
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关 键 词: | 解旋酶恒温基因扩增法 婴儿配方乳粉 阪崎克罗诺杆菌 检测 |
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