化学－酶法合成胸苷的研究

核苷及其衍生物在抗肿瘤、抗病毒方面具有广泛应用，如何高效绿色合成核苷一直是研究的重点．现以１－氯－２－脱氧－３’，５’－二－Ｏ－对氯苯甲酰基－Ｄ－核糖（化合物Ⅰ）为起始原料，采用结晶诱导不对称转化技术合成中间体２－脱氧－α－Ｄ－核糖－１－磷酸二环己胺盐（化合物Ⅲ），然后以化合物Ⅲ和胸腺嘧啶作为底物，利用大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）核苷磷酸化酶的催化作用合成胸苷．结果显示：化学法合成化合物Ⅲ获得较高的收率，可达到８４．９％，纯度为９４．７％；最佳生物酶催化反应条件：底物浓度为化合物Ⅲ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，胸腺嘧啶４００ｍｍｏｌ／Ｌ；菌体量为８０ｇ／Ｌ；缓冲液ｐＨ　８，反应温度５５℃，反应时间４ｈ，转化率达到６１．８％．最后，采用柱层析法分离得到胸苷，收率和纯度分别为４９．７％和９５．３％．该方法具有高选择、高效性及少污染的优点．