金雀异黄素通过AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路缓解免疫抑制大鼠的疲劳作用

目的：探讨金雀异黄素（genistein，GEN）缓解免疫抑制大鼠的疲劳作用及其作用机制。方法：96 只雄性SD大鼠随机分为6 组（每组16 只），分别为空白对照组、免疫抑制模型组与金雀异黄素低、中、高剂量组以及阳性对照组。除空白对照组外，其余组腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg mb，连续3 d，建立免疫抑制大鼠模型。金雀异黄素低、中、高剂量组分别灌胃10、20、40 mg/kg mb金雀异黄素，阳性对照组灌胃贞芪扶正颗粒3.125 g/kg mb，空白对照组灌胃等量花生油。实验结束后，记录大鼠力竭游泳时间；采用比色法检测大鼠血清中肌酸激酶（creatine kinase，CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）活力；酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）质量浓度；采用实时荧光定量技术检测大鼠骨骼肌中腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK）、沉默信息调节因子1（silent information regulator 1，SIRT1）、过氧化物酶增殖活化受体γ辅激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1α，PGC-1α）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptor γ，PPARγ）mRNA表达水平；采用蛋白免疫印迹法检测大鼠骨骼肌中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α和PPARγ的蛋白表达水平。结果：与免疫抑制模型组相比，补充GEN后极显著延长了大鼠力竭游泳时间（P＜0.01）；与免疫抑制模型相比，高剂量GEN能够显著降低血清中CK活力（P＜0.05）和LDH活力（P＜0.01），极显著提高大鼠血清中IgG、TNF-α质量浓度（P＜0.01），同时显著提高大鼠骨骼肌中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α和PPARγ基因及蛋白表达水平（P＜0.05、P＜0.01）。结论：GEN具有缓解免疫低下大鼠疲劳的作用，其机制可能与激活骨骼肌AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路及改善大鼠运动耐力、能量产生及免疫调节能力有关。