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微板核酸杂交检测芽孢杆菌属的方法建立
引用本文:刘婷,冯守帅,辛瑜,王武,杨海麟.微板核酸杂交检测芽孢杆菌属的方法建立[J].食品与生物技术学报,2015,34(2):175-182.
作者姓名:刘婷  冯守帅  辛瑜  王武  杨海麟
作者单位:江南大学生物工程学院
基金项目:国家863计划项目(2012AA021302)
摘    要:以白酒发酵过程中的优势菌枯草芽孢杆菌为模式菌株,针对具有高保守性及特异性的16SrRNA设计一组核酸探针,建立了对芽孢杆菌属进行定性和定量分析的新型的微板核酸杂交检测方法,优化了关键检测条件。结果表明,当S1酶反应温度为42℃时,芽孢杆菌属检测探针能分开目标序列仅差一个碱基的近缘属。当捕获探针和信号探针工作浓度均为5nmol/L,与分析探针杂交温度都为50℃,杂交时间分别为60min和15min时,检测信号的强弱与细菌数呈良好的线性关系,能实现定量检测,灵敏度高达1.33×102cells/mL。本方法提供了一个快速定性定量的检测技术,具有很好的应用于白酒发酵过程中芽孢杆菌属实时监测的潜力。

关 键 词:微板核酸杂交技术  芽孢杆菌属  16S  r  RNA  定性  定量

Development of A Novel Microplate Sandwich Hybridization Assay for Detection of Bacillus
LIU Ting,FENG Shoushuai,XIN Yu,WANG Wu and YANG Hailin.Development of A Novel Microplate Sandwich Hybridization Assay for Detection of Bacillus[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2015,34(2):175-182.
Authors:LIU Ting  FENG Shoushuai  XIN Yu  WANG Wu and YANG Hailin
Affiliation:LIU Ting;FENG Shoushuai;XIN Yu;WANG Wu;YANG Hailin;School of Biotechnology,Jiangnan University;
Abstract:
Keywords:S1-MSH  Bacillus  16S rRNA  identification  quantification
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