| 多重耐药维氏气单胞菌porin基因敲除的构建及其耐药特性研究 |
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| 引用本文： | 王晓磊,刘兆平,李子雁,周厚宇,张 开,温际富,宋一晓,刘云国,隋智海.多重耐药维氏气单胞菌porin基因敲除的构建及其耐药特性研究[J].食品安全质量检测技术,2023,14(9):34-42. |
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| 作者姓名： | 王晓磊 刘兆平 李子雁 周厚宇 张 开 温际富 宋一晓 刘云国 隋智海 |
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| 作者单位： | 临沂大学教育学院；菲律宾克里斯汀大学国际学院;临沂大学生命科学学院;临沂大学化学与化工学院;齐鲁制药集团有限公司 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(32002435)、山东省自然科学基金资助项目(ZR2019BC102)、临沂大学高层次人才(高水平博士)科研启动项目(LYDX2019BS026) |
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| 摘 要： | 目的 研究微孔蛋白基因porin对维氏气单胞菌（Aeromonas veronii, A. veronii）耐药性的影响以解析A. veronii的耐药机制。方法 以多重耐药的A. veronii WL-3为研究对象，采用同源重组双交换的方法构建Δporin敲除株，利用比浊法测定其生长曲线，通过药敏纸片法分析其耐药性。结果 从A. veronii WL-3基因组DNA中扩增porin的上、下游同源臂。利用overlap 聚合酶链式反应技术扩增获得上下同源臂融合片段，并连接至自杀质粒pDM4中，重组成敲除质粒pDM4-Δporin。将pDM4-Δporin转化至感受态大肠杆菌SM10中，通过接合转移转入A. veronii WL-3中。通过同源重组双交换构建A. veronii WL-3 Δporin敲除株。生长曲线显示与野生株相比，Δporin菌株的生长速度并无明显变化；药敏纸片实验表明敲除porin基因会降低A. veronii对头孢氨苄、新霉素、四环素、环丙沙星等10种抗生素的敏感性，提高对多粘菌素B的敏感性。结论 基因porin不是A. veronii生长所必需的，但会影响A. veronii对部分抗生素的敏感度。本研究所构建的敲除株可为深入研究porin在A. veronii的耐药机制提供必要材料。?
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| 关 键 词： | 维氏气单胞菌 porin基因 同源重组 基因敲除 耐药性 |
| 收稿时间： | 2023/1/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2023/5/15 0:00:00 |
Construction of a porin knockout strain of multidrug-resistant Aeromonas veronii and its drug resistance characteristics |
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| WANG Xiao-Lei,LIU Zhao-Ping,LI Zi-Yan,ZHOU Hou-Yu,ZHANG Kai,WEN Ji-Fu,SONG Yi-Xiao,LIU Yun-Guo,SUI Zhi-Hai.Construction of a porin knockout strain of multidrug-resistant Aeromonas veronii and its drug resistance characteristics[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2023,14(9):34-42. |
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| Authors: | WANG Xiao-Lei LIU Zhao-Ping LI Zi-Yan ZHOU Hou-Yu ZHANG Kai WEN Ji-Fu SONG Yi-Xiao LIU Yun-Guo SUI Zhi-Hai |
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| Affiliation: | Linyi University |
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| Keywords: | Aeromonas veronii porin gene Homologous recombination Gene knockout Drug resistance |
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