摘 要: | 目的 建立重组人白细胞介素-12(recombinant human interleukin-12,rhIL-12)注射液蛋白纯度反相高效液相色谱(reversephase high performance liquid chroomatography,RP-HPLC)检测方法,并进行验证。方法 采用YMC C4液相色谱柱(250 mm×4.6 mm)检测rhIL-12纯度。流动相A:0.05%三氟乙酸-水溶液;流动相B:0.05%三氟乙酸-乙腈溶液;流速为:1.0 mL/min;柱温为:30℃;检测波长为:280 nm;进样量为:1 000μL;进行梯度洗脱。验证方法的专属性、精密性和耐用性,并确定检测限及定量限。同时采用建立的方法检测3批rhIL-12注射液的蛋白纯度。结果 rhIL-12注射液的保留时间为16.957 min,积分范围内可见单一目的峰;空白溶剂(流动相A、流动相B、制剂Buffer)在积分范围内均无吸收峰;rhIL-12注射液降解峰杂质与目的峰分离情况良好,分离度为2.58,理论塔板数为17 666;同一实验员连续6次检测的主峰保留时间、主峰面积及主峰百分比RSD...
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