| 摘 要： | 目的 建立前列腺癌组织中胶原三股螺旋重复蛋白1(collagen triple helix repeat containing 1,CTHRC1)基因转录水平的微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法，并进行验证。方法 根据GenBank中登录的CTHRC1基因序列设计引物，扩增CTHRC1保守区基因片段，并合成含有该基因片段的PUC57质粒。经2%琼脂糖凝胶电泳验证引物的特异性后，采用PUC57质粒验证ddPCR法的正确度、精密性，并确定检测限及线性范围。采用建立的ddPCR法检测复旦大学附属中山医院泌尿外科住院患者73份前列腺穿刺组织样本(前列腺癌组织40份，非前列腺癌组织33份)中的CTHRC1基因转录水平，同时采用试剂盒检测患者血清中的总前列腺特异抗原(total prostate specific antigen,TPSA)水平，将相应结果进行ROC曲线分析，以获得CTHRC1-TPSA联合检测对诊断前列腺癌的预测概率。结果经2%琼脂糖凝胶电泳验证设计的引物具有良好的特异性。检测值和理论值之间的Log值差异均<1，且拟合度高，R2=0...
|
