重组腺病毒疫苗插入基因表达产物鉴别方法的建立及验证

目的 建立重组腺病毒疫苗插入基因表达产物的鉴别方法，并进行验证。方法 采用Western blot法对重组腺病毒感染后的细胞上清液进行检测，鉴别插入基因表达产物是否表达。对方法的专属性和耐用性进行验证，并采用该方法鉴别3批重组腺病毒疫苗样品插入基因表达产物的活性。结果 重组腺病毒疫苗插入基因表达产物能被黏蛋白1-生存素[mucin 1(MUC1)-Survivin]的两种抗体分别识别，在相对分子质量约37 000处可见特异性条带，大小和组成与实际值相符，方法的专属性和耐用性均符合要求。3批重组腺病毒疫苗插入基因表达产物也均能被MUC1-Survivin的两种抗体分别识别，在相对分子质量约37 000处可见特异性条带，而阴性对照不能被识别。结论 采用Western blot法检测插入基因表达产物的活性，专属性和耐用性均较好，适用于重组腺病毒疫苗产品的鉴别试验，可为疫苗制备过程中的质量控制及产品检定提供参考。