| 烟草中TMV、CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用 |
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| 引用本文： | 杨金广,张帅,申莉莉,钱玉梅,陈德鑫,王长栓,黄瑾,王凤龙.烟草中TMV、CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用[J].中国烟草学报,2010,16(4). |
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| 作者姓名： | 杨金广 张帅 申莉莉 钱玉梅 陈德鑫 王长栓 黄瑾 王凤龙 |
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| 作者单位： | 1. 农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室,中国农业科学院烟草研究所,青岛,266101
2. 广西区烟草公司百色市公司,百色右江区城东大道,533000 |
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| 基金项目： | 广西区烟草专卖局科技项目 |
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| 摘 要： | 利用DNAMAN软件对GenBank数据库中已登录的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaicvirus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virusY,PVY)全基因组序列进行序列比对,选择最保守的区域,进行相应病毒的引物设计,建立了多重RT-PCR检测烟草中TMV、CMV和PVY的技术体系。对3条扩增片段进行回收、测序和BLAST比较,结果表明多重RT-PCR所扩增的片段序列均与预期设计序列相符,同源性均在98%以上。利用多重RT-PCR对广西区132个烟草病毒病样品进行检测分析,结果表明TMV检出率为91.7%,CMV检出率为18.2%,PVY检出率为55.3%。较单一的RT-PCR,具有简便、快速和经济的特点。与酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)相比,其检测限度高出ELISA的检测限度104级数,具有更高的特异性与准确性。该方法可以同步快速、特异地检测出烟草中TMV、CMV和PVY病毒的侵染。
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| 关 键 词： | 烟草 多重RT-PCR 病毒检测 应用 |
Establishment and application of multiple RT-PCR for detection of TMV,CMV and PVY in tobacco |
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| YANG Jin-guang,ZHANG Shuai,SHEN Li-li,QIAN Yu-mei,CHEN De-xin,WANG Chang-shuan,HUANG Jin,WANG Feng-long.Establishment and application of multiple RT-PCR for detection of TMV,CMV and PVY in tobacco[J].Acta Tabacaria Sinica,2010,16(4). |
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| Authors: | YANG Jin-guang ZHANG Shuai SHEN Li-li QIAN Yu-mei CHEN De-xin WANG Chang-shuan HUANG Jin WANG Feng-long |
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