大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因的克隆表达、纯化及多抗血清的制备 |
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作者单位: | ;1.河南工业大学粮油食品学院 |
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摘 要: | RT-PCR克隆大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因,根据序列设计引物,扩增目的基因的开放阅读框,与MBP载体连接,测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达.亲和层析法纯化重组蛋白,SDS-PAGE验证蛋白的纯度,免疫新西兰大白兔,收集多抗血清,用ELISA法测效价.扩增出含Gly m Bd 28K目的基因片段,诱导并获得高浓度和预期相符的表达产物,经层析纯化出Gly m Bd 28K蛋白,免疫新西兰大白兔,获得效价为1∶1.6×106多抗血清.
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关 键 词: | 大豆 过敏原 Gly m Bd 28K 克隆 多克隆抗体 |
CLONING,EXPRESSION AND PURIFICATION OF MAJOR SOYBEAN ALLERGEN Gly m Bd 28K GENE AND PREPARATION OF ITS POLYCLONAL ANTIBODIES |
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