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表面活性剂脱氧胆酸钠在单增李斯特菌死活细胞EMA-PCR鉴别中的应用
引用本文:郝乐友,吕淑霞,张超,于晓丹,马镝,曹慧颖. 表面活性剂脱氧胆酸钠在单增李斯特菌死活细胞EMA-PCR鉴别中的应用[J]. 食品与发酵工业, 2013, 39(6): 174-179
作者姓名:郝乐友  吕淑霞  张超  于晓丹  马镝  曹慧颖
作者单位:沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁沈阳,110866
摘    要:通过脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD)结合染料叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与PCR反应体系相结合,建立纯培养条件下区分单增李斯特菌死活细胞的方法,即SD-EMA-PCR鉴别单增李斯特菌死活细胞检测法。结果表明:向浓度为2.0×108CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中加入终浓度为1.5 mg/mL的表面活性剂脱氧胆酸钠后,EMA激活光解最佳曝光时间为25 min。SD-EMA-PCR检测体系中,对死菌细胞DNA的PCR扩增抑制的EMA最小浓度为1.6μg/mL;而对活菌细胞DNA的PCR扩增不抑制的EMA最大浓度为9μg/mL,活菌细胞的最低检出限为20 CFU/mL。SD-EMA-PCR检测法能够减小EMA-PCR漏检死菌细胞给检测结果带来假阳性的可能,降低了检测的成本,为单增李斯特菌的快速检测提供了一种新的有效途径。

关 键 词:表面活性剂  脱氧胆酸钠  单增李斯特菌  死活细胞  叠氮溴乙锭

The surfactant application of sodium deoxycholate in the EMA-PCR discrimination of viable and dead cells of Listeria monocytogenes
HAO Le-you,LV Shu-xia,ZHANG Chao,YU Xiao-dan,MA Di,CAO Hui-ying. The surfactant application of sodium deoxycholate in the EMA-PCR discrimination of viable and dead cells of Listeria monocytogenes[J]. Food and Fermentation Industries, 2013, 39(6): 174-179
Authors:HAO Le-you  LV Shu-xia  ZHANG Chao  YU Xiao-dan  MA Di  CAO Hui-ying
Affiliation:(College of Bioscience and Technology Shenyang Agricultural University,Shenyang 110866,China)
Abstract:
Keywords:surfactant  sodium deoxycholate  Listeria monocytogenes  viable and dead cells  ethidium bromide monoazide
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