谷氨酰胺转胺酶的分离纯化及酶学性质

茂原链轮丝菌Streptoverticillium mobaraense所产生的谷氨酰胺转胺酶发酵液通过抽滤、超滤、乙醇沉淀、离心和冷冻干燥，制得粗酶粉的酶活约为1033U／g。对粗酶研究发现，该酶的最适反应温度为52℃，最适pH为6.0；粗酶的pH稳定范围在4－8，温度稳定范围在20－40℃，离子强度对该酶的活性稍有影响，粗酶经CM－纤维素层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶，通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳检验蛋白质纯度，得到较弱的单一区带，其中，CM－纤维素层析的纯化倍数为4.5，收率质量分数约为78.8%；凝胶过滤层析纯化倍数为1.11，收率质量分数为50％；用凝胶过滤法测得谷氨酰胺转胺酶的相对分子质量为40092。