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生物转化合成N-乙酰神经氨酸的关键因素
引用本文:朱德强,詹晓北,吴剑荣,郑志永,赵忠胜,王永远. 生物转化合成N-乙酰神经氨酸的关键因素[J]. 食品与生物技术学报, 2019, 38(4): 64-70
作者姓名:朱德强  詹晓北  吴剑荣  郑志永  赵忠胜  王永远
作者单位:江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室
摘    要:在前期工作中已构建了一株能以外源N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和胞内磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)为底物,生物转化合成N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)的重组大肠杆菌,但其合成Neu5Ac的效率有待进一步提高。通过调整生物转化阶段培养基中氮源和碳源的组成,探寻Neu5Ac合成过程中的关键限制性因素。结果表明,增加唾液酸合成酶NeuB活性的措施没有提高Neu5Ac的产率,而底物之一胞内PEP的供给不足是限制Neu5Ac合成的关键性因素。通过限制转化培养基中的氮源,抑制重组大肠杆菌的生长,避免了PEP被用于细胞自身生长而更多地流向Neu5Ac合成方向;通过改用不依赖PTS跨膜转运系统的甘油作为碳源,在甘油/无氮转化培养基中Neu5Ac合成量最终达到(4.42±0.08) g/L,比初始合成条件高出10.3倍。

关 键 词:唾液酸;N-乙酰神经氨酸;磷酸烯醇式丙酮酸;N-乙酰氨基葡萄糖;全细胞生物转化

Key Limiting Factors for the Whole-Cell Synthesis of N-Acetyl Neuraminic Acid by Recombinant Escherichia coli
ZHU Deqiang,ZHAN Xiaobei,WU Jianrong,ZHENG Zhiyong,ZHAO Zhongsheng and WANG Yongyuan. Key Limiting Factors for the Whole-Cell Synthesis of N-Acetyl Neuraminic Acid by Recombinant Escherichia coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2019, 38(4): 64-70
Authors:ZHU Deqiang  ZHAN Xiaobei  WU Jianrong  ZHENG Zhiyong  ZHAO Zhongsheng  WANG Yongyuan
Abstract:
Keywords:
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