| D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖 |
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| 引用本文： | 胡兴,张涛,沐万孟,缪铭,江波.D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖[J].食品与生物技术学报,2019,38(4):58-63. |
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| 作者姓名： | 胡兴 张涛 沐万孟 缪铭 江波 |
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| 作者单位： | 食品科学与技术国家重点实验室江南大学;江南大学食品学院 |
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| 摘 要： | 将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因yihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达。重组菌株经IPTG诱导培养6 h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL。重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与。该酶在40℃和pH 7.5条件下表现出催化D-果糖的最高活性,转化率为25%左右;通过研究底物浓度对酶活性的影响,得出该酶的活性不受底物浓度的抑制,以D-果糖为底物时,动力学参数Km为123.32mmol/L,Vmax为113.64μmol/(min·mg),催化效率kcat/Km为0.691 (s·mmol/L)。
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| 关 键 词： | D-甘露糖 D-甘露糖异构酶 表达 生物制备 |
Cloning and Expression of D-Mannose Isomerase from Escherichia coli BL21 and its Application for D-Mannose Production |
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| HU Xing,ZHANG Tao,MU Wanmeng,MIAO Ming and JIANG Bo.Cloning and Expression of D-Mannose Isomerase from Escherichia coli BL21 and its Application for D-Mannose Production[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2019,38(4):58-63. |
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| Authors: | HU Xing ZHANG Tao MU Wanmeng MIAO Ming and JIANG Bo |
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